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第七章 发酵工艺的控制 第一节 工业发酵的主要类型及代谢特征 第二节 工业发酵过程的主要控制参数 第三节 七个主要参数对发酵的影响及其控制 【菌体浓度、基质浓度、溶氧浓度、pH 温度、CO2】 第四节 发酵终点的判断 第一节 工业发酵的主要类型及代谢特征 一、微生物的代谢产物类型 二、工业发酵的主要类型 三、发酵过程的代谢变化规律 一、微生物的代谢产物类型 (一)初级代谢产物 定义:微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质。 举例:氨基酸、核苷酸、多糖、脂类等。 特征: 不同的微生物初级代谢产物基本相同; 初级代谢产物合成过程是连续不断的。 一、微生物的代谢产物类型 (二)次级代谢产物 定义:微生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、对该微生物无明显生理功能,或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质。 举例:抗生物、毒素、激素、色素、维生素等。 特征: 不同的微生物次级代谢产物不同(种的特异性); 次级代谢产物是微生物生长到一定阶段才合成的。 热原质(pyrogen):或称致热原。是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应物质。产生热原质的细菌大多是革兰阴性菌,热原质即其细胞壁的脂多糖。 毒素与侵袭性酶:细菌产生外毒素和内毒素两类毒素。外毒素(exotoxin)是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程中释放到菌体外的蛋白质;内毒素(endotoxin)是革兰阴性菌的脂多糖。 色素:细菌的色素有两类——水溶性色素,能弥散到培养基或周围组织。脂溶性色素,不溶于水,只存在与菌体,是菌落显色而培养基颜色不变。 抗生素:某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。 细菌素:某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。 维生素:细菌能合成某些维生素除供自身需要外,还能分泌到周围环境中。 次级代谢与初级代谢的关系 关系密切,初级代谢的关键性中间产物往往是次级代谢的前体,比如糖降解过程中的乙酰-CoA是合成四环素、红霉素的前体;一般菌体的次级代谢在对数生长后期或稳定期间进行,受环境条件的影响; 次级代谢产物在微生物生命活动过程中的产生极其微量,它们没有一般性的生理功能,也不是生物体生长繁殖的必需物质,但对其它生物体往往具有不同的生理活性作用 问题:比较初级代谢产物和次级代谢产物 二、 发酵类型 (一)按培养基的状态可分为2种类型: 固体发酵 (浅层发酵、深层固体发酵 ) 液体发酵 (表面发酵、深层发酵) 固体发酵:将纯种微生物接种、培养在固体培养基上 优点:设备简单,能耗低,原料粗放,不易污染,产物回收所耗溶剂和所生废水均少。 缺点:设备占地面积多,劳动强度大,传质和传热困难,副产物多,培养过程中进行检测困难。 液体发酵 液体发酵是将发酵原料制成液体培养基,接种微生物,通过其代谢活动使发酵原料转化成发酵产品。有表面发酵和深层发酵两种形式 深层发酵:是菌体或菌丝体均匀分散在液体培养基中,通过向培养液强制通气或不通气以及搅拌进行产物合成。 优点:设备占地面积少,生产规模大;发酵速度快,生产效率高;生产机械化,易于自动控制,劳动生产率高;发酵设备密闭,传热传质良好,生产便于管理;副产物少,有利于产品提取,所得产品质量高。 缺点:是设备条件要求较高。 (二)按操作方式不同可分为3种类型 (1)分批发酵(Batch fermentation) 指在一个密闭系统内一次性投入有限数量营养物进行发酵的方法。 Fin=Fout=0 (无培养基进出) (2)补料分批发酵(Fed-batch fermentation) 在分批发酵中间歇地或连续地补加(流加)新鲜培养基的方法。 Fin ≠0 ;Fout= 0 或Fout ≠ 0 (3)连续发酵(Continuous fermentation) 以一定的速度向发酵罐内连续供给新鲜培养基,同时以相同速度将含有微生物和产物的培养液从发酵罐内放出, Fin=Fout>0 (培养基有进有出) 三、发酵过程的代谢变化规律 代谢变化:反映在发酵过程中,菌体的生长、发酵参数(培养基,培养条件等)和产物形成速率三者间的关系。 代谢曲线:把菌体的生长、发酵参数(培养基,培养条件等)和产物形成速率三者随时间变化的过程绘制成图,就成为代谢曲线。 3种发酵类型的代谢曲线 三种操作方式下的代谢特征 (一)分批发酵 1、分批发酵的定义 在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵方式。在这一过程中,除了氧气、消泡剂及控制pH的酸或碱外,不再加入任何其它物质。发酵过程中培养基成分减少,微生物得到繁殖 2、分批发酵的特点 微生物
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