通过关键技术研究应用基因在小麦与叶锈菌互作过程中的反应.docVIP

毕业论文 题 目：经过VIGS技术研究ATG8基因在小麦和叶锈菌互作过程中HR反应 学 院： 专业班级： 学 号： 学生姓名： 指导老师姓名： 指导老师职称： 二O一二 年 六 月 十四 日 经过VIGS技术研究ATG8基因在小麦和叶锈菌互作过程中HR反应 摘要：由小麦叶锈菌(Puccinia triticina)引发小麦叶锈病在世界各地产麦区全部有发生。植物抵御病原体侵入所诱发超敏反应在小麦抵御叶锈菌侵染过程中占相关键地位。ATG8基因参与了小麦抵御叶锈菌侵染过程中自噬发生，ATG8蛋白家族作为一个已被判定膜结合蛋白，在自噬功效中含相关键作用。本试验经过VIGS技术缄默掉小麦中自噬相关基因ATG8，进而利用HR荧光染色技术研究分析在小麦和叶锈菌互作过程中ATG8基因对HR反应影响，为深入探讨ATG8基因和自噬功效研究奠定了基础。 关键词：小麦;叶锈菌;自噬;HR;VIGS The hypersensitive response of ATG8 gene in Wheat-leaf Rust Interaction researching by VIGS technology Abstract:Wheat leaf rust caused by Puccinia triticina is a serious and widely distributed disease of wheat.The Hypersensitive Reaction (HR) induced by the invasion of pathogens in the plants plays a very important part in the process of the wheat resistant to the pathogen. ATG8 genes involved in the process of autophagy during wheat resistance to leaf rust infection.As a confirmed membrane-binding protein family, ATG8 plays an important role in the autophagy function. In this article we Silent out ATG8 genes,the autophagy-related genes in wheat, via VGIS technology and then use the HR fluorescent staining technique to study the impact of ATG8 genes on the HR response in the wheat leaf rust interaction.And all of this laid the foundation for further study of the ATG8 genes and autophagy functions. Keywords: Wheat;leaf Rust; Autophagy;HR;VIGS TOC \o 1-3 \h \z \u 1 引言 1 1.1 小麦和叶锈菌 1 1.2 PCD 1 1.2.1 PCD和HR 1 1.2.2 自噬 1 1.3 VIGS技术 2 1.4 本试验研究目标 2 2 材料和方法 3 2.1 材料 3 2.1.1 小麦、供试菌和病毒 3 2.1.2 关键试剂及仪器 3 2.2 方法 4 2.2.1 幼苗培养 4 2.2.2 摇菌提质粒 4 2.2.3 酶切线性化 5 2.2.3 接菌 6 2.2.4 取样 6 2.2.5 HR荧光染色 6 3 结果 6 3.1 体外转录结果检测图 6 3.2 病毒侵染小麦结果 7 3.3 HR荧光染色结果 7 4 讨论和分析 8 4.1 病毒侵染小麦结果分析 8 4.2 HR荧光染色结果分析 8 4.3 本试验问题分析 9 5 结论 9 1 引言 1.1 小麦和叶锈菌 小麦（Triticum aestivum）是世界上分布范围最广、栽培面积最大、总产量最高粮食作物。小麦叶锈菌是一个严格活体寄生性真菌，同寄主之间存在着高度小种一品种专化性，并在小麦上形成夏孢子和冬孢子，冬孢子萌发产生担孢子。该菌在华北、西北、西南、中南等广大麦区自生麦和晚熟春麦