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- 2020-11-11 发布于江苏
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基因工程细胞工程知识点汇总
一、基因工程(一)基因工程概念基因工程是指根据大家愿望,进行严格设计,经过体外DNA重组和转基因技术,给予生物以新遗传特征,发明出更符合大家需要新生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工,又叫做DNA重组技术。(一)基因工程基础工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)起源:关键是从原核生物中分离纯化出来。(2)功效:能够识别双链DNA分子某种特定核苷酸序列,而且使每一条链中特定部位两个核苷酸之间磷酸二酯键断开,所以含有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)比较:①相同点:全部缝合磷酸二酯键。②区分:E·coliDNA连接酶起源于T4噬菌体,只能将双链DNA片段互补黏性末端之间磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端之间效率较低。(2)和DNA聚合酶作用异同:? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有核苷酸片段末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——载体(1)载体含有条件:①能在受体细胞中复制并稳定保留。②含有一至多个限制
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