器官发生与体细胞胚胎发生ppt参考课件.ppt

通过腋芽的形成来增加芽的数量时，应从带有营养芽的部分得到外植体，并注意以下问题。（1）外植体大小，如为一般繁殖而非脱毒繁殖，可使用普通茎尖、芽或带芽的茎切段作为外植体。（2）取材植株的生理状态对培养成败是极重要的，一般在植物开始生长，芽已膨大但芽鳞片还未张开时最为合适，此时芽生长旺盛，并有芽鳞片的保护，不易污染。为了避免季节的影响，在有条件时也可以将植物放在光、温条件稳定的人工气候箱或温室中，使植物保持营养生长状态，对某些需低温或高温或特殊光周期处理才能打破休眠的块茎、鳞茎、球茎等，常要处理后才可剥取茎尖进行培养。（3）芽在植物株上的部位也是需要注意的，在一些草本植物（如菊花等）中，使用顶芽或上部的芽作为分生组织或茎尖培养时的成功率常比侧芽或基部的芽要高，这可能和它们生长较旺盛有产。（4）多年生的木本植物随着年龄的增加，分生组织、茎尖和芽的培养越困难，特别是成年树较幼态树的培养要困难得多，此时，常使用部分返幼阶段或年龄较低的根蘖苗或不定芽做材料，或采取某些措施如将芽接在实生苗上，修剪、保持高水平的水肥进行营养繁殖，或用细胞分裂素喷洒植株的方法等。 * 在通过不定芽途径使芽增殖时，可以根据不同的植物采用不同的外植体，如根、茎、叶或花器官的各部分，在自然界中能够产生不定芽的器官应当首先被采用，如非洲紫罗兰、秋海棠、大岩桐、落地生根等可用叶片，某些兰花等可以用茎尖；很多种植物，特别是单子叶植物，可以作用花器官，如黄花菜、鸢尾等。 在使用体细胞胚胎发生途径时，常使用胚分生组织或生殖器官作为外植体 * 2．外植体的消毒 * （三）芽的诱导及扩大化繁殖（增殖） 这是快繁技术中最重要性一环，在这一阶段潜在的植物体体（芽或胚状体）通过腋芽的形成和生长、外植体或愈伤组织上不定芽的形成和胚状体发生三条件途径在数量上得迅速增殖，由于外植体种类的不同，在增殖时可能采用的途径不同。 * 1．??? 促进腋芽的形成和生长 在高等植物的每一个叶腋中通常都存在着腋芽，每一个腋芽在一定的条件下都能生长并形成一个枝条，项端优势可抑制腋芽生长，使用外源的细胞分裂素可以打破顶端优势，促进腋芽生长。在培养条件下，为了促使腋芽生长，需在培养基中加入一定浓度的合适种类的细胞分裂素，有时同时可加入少量的生长素以促进腋芽的生长（注意：生长素过多易导致愈伤化）。由于细胞分裂素的持续作用，腋芽生长成枝条，新产生的枝条的腋芽在细胞分裂素的作用下又可生长，这样反复数次就可以形成一丛嫩枝，将它们切割成带有几个芽的小块接种到同样的培养基上，这一过程又能重复进行，这样就可以在短时间内产生大量的芽。有些植物即使在含有细胞分裂素的培养基中其项端优势也不易被打破，接种的茎尖只能长成不分枝的一根枝条，此时可以用切段法（每个切段带有一个腋芽）加以繁殖。 用促进腋芽生长的方式进行增殖时，一般速度较其它两种方法要慢些，但每经一个流程，嫩枝就以对数速度增长，并且由于茎尖的细胞是均一的二倍体，又不易受环境条件的影响而发生变异，所以遗传的稳定性较好，适用这种方法繁殖的植物种类也较多。 * 2．诱导不定芽的形成 从现存的芽之外的任何组织器官上通过器官发生行政机关后期怕芽称为不定芽。 通过不定芽形成途径进行快繁，对于很多有贮藏器官的植物如百合、风信子等是很合适的，因为这些植物在自然条件下的营养繁殖速度一般不太快，而它的鳞片、叶基部或花梗等在培养时都容易产生不定芽或小鳞茎或小球茎等不定器官，而且这一过程常可在试管中反复进行。 不定芽也可以在愈伤组织上上产生，但如果经过愈伤组织阶段，特别是多次继代的愈伤组织，不但器官发生的能力会逐渐降低以至完全丧失，而且后代的遗传性不能稳定，所以在快速繁殖中除少数作物外常不使用这种方法。 对于不定芽的形成，除特殊情况外，一般都要在培养基中同时加入适当的细胞分裂素和生长素。 * 3．诱导胚状体的形成 在自然界只有少数植物可以通过体细胞胚胎发生而产生胚状体，但在培养条件下，现在已知有30多个科、150多种植物可以产生胚状体。诱导胚状体时一般使用胚分生组织或生殖器官的组织作为外植体。在一个含有丰富还原态氮的基本培养基，在存在生长素，特别是2，4-D时诱导胚状体的发生，然后转移到降低浓度呀没有生长素的培养基上使胚状体成熟和生长。 * 通过胚状体发生途径可以在一个委小的容器中产生比前两种增殖方法高得多的增殖速度，而且由于胚状体是两极性的可以免去诱导生根的步骤，加上它容易分散，可以减少前两种增殖方法中因分离、切割、接种所需消耗的大量人力，有利于将来实行机械化的操作。如果能够控制好胚状体发生和生长的同步性，诱导休眠和制造人工种子的技术无疑将是最理想的快速繁方法，但是目前除柑桔、枣椰、油棕和咖啡等少数作物外，这种方法使用并不普遍。这是因为很多重要的经济作物还不能诱导胚状体的发生或者