分子生物学课件 蛋白质结构与功能.pptVIP

分子内分子伴侣 前导肽就是分子内伴侣，分两类： 1.参与肽链延伸和正确折叠，如蛋白水解酶。 2.参与蛋白质胞内转运和定位，不直接参与折叠。 分子内分子伴侣介导折叠的特点： 1.与待折叠的多肽共价连接。 2.在结构及编码基因上与它作用的蛋白质紧密连接。 3.与经它作用后已折叠的蛋白质相互作用，并是其竞争性抑制剂。 4.释放底物是不依赖ATP的，取决于被折叠的底物或其他蛋白酶水解。 二、一级结构的修饰 （一）肽链N-端的切除 * * 肽链N端甲硫氨酸残基的切除 1.磷酸化：丝、苏、酪氨酸残基 意义：调节蛋白质结构与功能 （二）特定氨基酸的共价修饰 * * 2.甲基化：肽链N末端、组蛋白 3.乙酰化：组蛋白分子的赖氨酸残基 4.羟基化：胶原蛋白前体赖、脯氨酸残基 5.羧基化：凝血因子谷氨酸残基γ-羧基化 6.糖基化：O-糖苷键型、N-糖苷键型 7.脂酰化:长链脂肪酸共价修饰 （三）二硫键的形成 核糖核酸酶合成后，肽链中8个半胱氨酸残基构成了4对二硫键，此4对二硫键对它的酶活性是必需的。 二硫键也可以在链间形成，使蛋白质分子的亚单位聚合。 多蛋白质肽链合成后通过两个半胱氨酸的氧化作用生成二硫键，这对于维系蛋白质的空间构象很重要。 * * 例：鸦片促黑皮质素原(POMC，265个氨基酸残基) （四）多蛋白(polyprotein)的加工 * * * ACTH：促肾上腺皮质激素 ** MSH：促黑激素 *** CLIP：促肾上腺皮质激素样中叶肽 （五）蛋白质前体不必要肽段的切除 无活性的酶原转变为有活性的酶，常需去掉一部分肽链，如胰蛋白酶原酶解生成胰蛋白酶。 分泌型蛋白质“信号肽”的切除。 某些新生蛋白质含有部分间隔顺序等待剪切，其意义类似于hnRNA中的内含子，此片段称为内蛋白子（intein）。 * * 三、空间结构的修饰 结合蛋白质合成后都需要结合相应辅基，才能成为具有功能活性的天然蛋白质。 具有四级结构的蛋白质由两条以上的肽链通过非共价键聚合，形成寡聚体(oligomer)。 （一）亚基聚合 （二）辅基连接 * * 四、蛋白质合成后的靶向输送 蛋白质靶向输送(protein targeting) 真核生物蛋白合成后的三种去向： 是指蛋白质合成后经过一系列复杂的机制，定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位的过程。 保留在胞液； 进入细胞核、线粒体或其它细胞器； 分泌到体液。 * * 蛋白质的转运机制因合成部位不同而异 翻译运转同步机制：在内质网膜结合核糖体上合成的蛋白，其合成与运转同时发生。 翻译后运转机制：在细胞质游离核糖体上合成的蛋白，其蛋白从核糖体释放后才发生运转。 包括细胞分泌蛋白、膜整合蛋白、滞留在内膜系统(内质网、高尔基复合体、内体、溶酶体和小泡等)的可溶性蛋白。 包括预定滞留在细胞质基质中的蛋白、质膜内表面的外周蛋白、核蛋白以及参入到其它细胞器（线粒体、过氧化物酶体、叶绿体）的蛋白等。 * * “信号假说”__荣获1999年度的诺贝尔生理/医学奖。 20世纪70年代初布洛伯尔(Günter Blobel)发现:很多分泌性蛋白跨过细胞膜性结构时需切除N-末端的短肽； 提出:蛋白质分子被运送到细胞不同部位的“信号”存在于它的一级结构中；靶向不同的蛋白质各有特异的信号序列或成分。 信号序列(signal sequence) 所有靶向输送的蛋白质结构中，均有可引导蛋白质转移到细胞靶部位的分选信号，主要为N末端特异氨基酸序列。 * * 靶向输送蛋白 信号序列或成分 分泌蛋白 N端信号肽，13～36个氨基酸残基 内质网腔驻留蛋白 N端信号肽，C端-Lys-Asp-Glu-Leu-COO-（KDEL序列） 内质网膜蛋白 N端信号肽，C端-Lys-Lys-XX序列（X为任意氨基酸） 线粒体蛋白 N端信号序列，两性螺旋，12~30个残基，富含Arg、Lys 核蛋白 核定位序列 (-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-，SV40T抗原) 过氧化物酶体蛋白 C端-Ser-Lys-Leu-（SKL序列） 溶酶体蛋白 Man-6-P（甘露糖-6-磷酸） 靶向输送蛋白的信号序列或成分 * * 在粗面内质网膜结合的核糖体上合成的蛋白质，首先被其N端特异信号序列引导进入内质网，然后再由内质网包装、转移到高尔基体，并在此分选投送，或分泌出细胞，或被送到其它细胞器。 （一）分泌蛋白的靶向输送 信号肽的特点： 指各种新生分泌蛋白的N端都有的一段保守的氨基酸序列，长度一般为13~36个氨基酸残基。 ① N端常有1个或几个带正电荷的碱性氨基酸残基，如赖氨