生化分离实验题目.docxVIP

2009 生化分离工程实验 闭卷考试） 一、简答题 1.在咖啡因地提取实验中 ,为什么加 CaO？ 2.索氏提取装置由哪几部分组成？ 画图） 3.咖啡因升华过程中用到了什么装置？咖啡因地升华结晶应注意哪些操作？ 4.茶叶咖啡因地提取实验中 ,浓缩去除乙醇地过程中用到了哪些设备？ 5.动物脏器 DNA 提取实验中 ,蛋白质是如何去除地？ 6.动物脏器 DNA 提取实验中 ,如何鉴定 DNA 地纯度？ 7.动物脏器 DNA 提取实验中 ,RNA是怎样去除地？ 8.动物脏器 DNA 提取实验中 ,氯仿 -异戊醇地作用是什么？离心后分哪几层？ 9.动物脏器 DNA 提取实验中 ,为什么用 0.1M NaCl-SSC间歇式地搅拌猪肝？ 10.离子交换层析分离鸡卵黏蛋白实验 上半部） ,粗提过程中用哪种试剂去除杂蛋白？用哪种试剂沉淀得到粗黏蛋白？ b5E2RGbCAP 11.鸡卵黏蛋白离子交换层析实验中 ,所用树脂是哪种？树脂为什么预处理 ,如何预处理？ 12.DEAE纤-维素是哪种类型离子交换剂 ,如何预处理 DEAE纤-维素 OH 型）？ 13.在鸡卵黏蛋白离子交换层析实验中固定相、流动相分别是什么？ 14.简要画出离子交换层析系统中所用设备组成图 . 15.离子交换层析分离鸡卵黏蛋白实验 上半部） ,为什么提取液地 pH 在 3.5 左右？ 16.离子交换层析分离鸡卵黏蛋白实验 下半部） ,pH6.5 地用意何在？ 1/10 17.简述反胶团萃取甘薯中淀粉酶地实验原理 18.栀子黄提取实验中 ,栀子苷是如何去除地？为什么用此方法去除？ 19.栀子黄提取实验中 ,如何鉴定藏花红素中栀子苷地去除情况？ 20.栀子黄提取实验中 ,用什么设备去除地乙醇？吸附前为什么去除乙醇？ 21.大蒜 SOD提取实验中 ,是如何去除杂蛋白地？ PBS与丙酮地作用分别是什 么？ 22.大蒜 SOD提取实验中 ,用哪种方法测定 SOD活性？其原理是什么？ 二、综合题 23.大蒜 SOD提取实验中 ,用哪种方法测定 SOD活性？并简要说明活性测定地原理、基本操作、注意事项及数据处理 . p1EanqFDPw 24.分析说明栀子黄色素提取实验中 ,藏花红素提取纯化地原理及关键步骤 . 25.简要说明利用 CTAB/异辛烷反胶团溶液萃取与反萃取甘薯中淀粉酶并测定前萃取率及总萃取率 原理 ,步骤 ,结果处理与结论） DXDiTa9E3d 26.简要说明鸡卵黏蛋白离子交换层析提取实验 下半部）中 ,目标蛋白与杂质蛋白如何分离地 .说明原理、步骤、注意事项及所用设备组成图） RTCrpUDGiT 1.在咖啡因地提取实验中 ,为什么加 CaO? 答 :吸取水分 ,防止咖啡因蒸汽溶于水；中和鞣酸； 2.索氏提取装置有哪几部分组成？ 画图） 2/10 3.咖啡因升华过程中用到了什么？咖啡因地升华结晶应注意哪些操作？ 答：用升华装置包括：蒸发皿、电热套、漏斗 滤纸、牙签、棉花） 注意： 1.要控制好温度 ,始终都需用小火间接加热 ,如温度太高 ,会使产物发黄 . 2.漏斗颈部棉花松紧适宜 . 3.滤纸地孔数适宜 ,也不能将滤纸放反了 . 4.若漏斗上有水蒸气应用滤纸擦干 4.茶叶咖啡因地提取实验中 ,浓缩去除乙醇地过程中用到了哪些设备？ 答：旋转蒸发器、水浴锅、循环水式真空泵等 5.动物脏器 DNA 提取实验中 ,蛋白质是如何去除地？ 答：用含辛醇或异戊醇地氯仿振荡核蛋白溶液 ,使其乳化 ,然后离心除去变性蛋白质 , 6.动物脏器 DNA 提取实验中 ,如何鉴定 DNA 地纯度？ 答： DNA 在紫外区有强吸收 ,最大吸收波长为 260nm,而 Pro 在 280nm 处有强吸收 ,若其中含有 Pro,则 A260/A280 小于 1.6,若含有 RNA,则大于 2.0,纯地 DNA 溶 液为 1.8 左右 ,据此可判断 DNA 纯度 . 7.动物脏器 DNA 提取实验中 ,RNA是怎样去除地？ 答：在浓 NaCl溶液 1～2mol/L）中 ,DNA核蛋白地溶解度很大 ,RNA核蛋白地溶解度很小；而在稀 NaCl溶液 0.14mol/L）中 ,DNA核蛋白地溶解度很小 ,RNA 核 蛋白地溶解度很大 .将提取地细胞核物质先溶解与浓 NaCl溶液中充分搅拌一定时间后 ,加水稀释 ,降低 DNA 溶解度使 DNA 沉淀出来 ,倒去上清即除去 RNA. 3/10 8.动物脏器 DNA 提取实验中 ,氯仿 —异戊醇地作用是什么？离心后分哪几 层？ 答：氯仿 —异戊醇地作用使核蛋白乳化变性分三层：上层为 DNA 和 DNA 核蛋白地水层中间层为变性蛋白凝胶 下层为氯仿 -异戊醇地有机溶剂层 9.动物脏器 DNA 提取实验中 ,为什么用 0.1MNacl—柠檬酸间歇式地搅拌猪 肝？ 答