磺胺二甲嘧啶SM2酶联免疫分析ELISA试剂盒使用说.docxVIP

磺胺二甲口密嚏（SM2酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书 1使用目的： 本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），鸡蛋、蜂蜜、 牛奶、血活和尿样中磺胺二甲嚅噬（SM2）残留的定量检测。 2实验原理 本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有磺胺二甲嚅噬（SM2）偶 联抗原，加入磺胺二甲嚅噬（SM2）标准品或样品，游离磺胺二甲嚅噬（SM2） 与微孔条上预包被的磺胺二甲嚅噬（SM2）偶联抗原互相竞争抗磺胺二甲嚅噬 （SM2）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色， 用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中磺胺二甲嚅噬（SM2）含 量成反比，通过标准曲线计算样品中磺胺二甲嚅噬（SM2）的含量。 3试剂盒组成 3.1预包被的磺胺二甲嚅噬（SM2）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔X8 条）。 3.2磺胺二甲嚅噬（SM2）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是： 0 ppb, 0.1 ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1 ppb 3.3抗磺胺二甲嚅噬（SM2）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。 3.4显色液A: 1瓶（6ml）。 3.5显色液B: 1瓶（6ml）。 3.6终止液：1瓶（6ml） , 2M 硫酸。 3.7样本稀释液：1瓶（10X 6ml）,用于样品稀释用。 3.8浓缩洗涤液：1瓶（20X 20ml）,用于洗板。 3.9说明书一份。 4需要而未提供的材料 4.1设备 4.1.1波长450nm酶标仪。 4.1.2粉碎机。 4.1.3量筒。 4.1.4振荡器。 4.1.5S 斗。 4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。 4.1.7微量移液器。 4.2试剂 4.2.1去离子水或蒸僻水。 4.2.2甲醇。 5贮存 5.1试剂盒贮存于2~8C,切勿冷冻 5.2未用完的微孔板应该密封十燥保存 6注意事项 6.1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。 6.2不要使用过期试剂盒。 6.3试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25史C），建议至少回温2小时。 6.4标准品中含有磺胺二甲嚅噬（SM2）,使用时应特别注意，操作时应带 手套。 6.5终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。 6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。 6.7不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混 用，否则会影响实验结果。 6.8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果 6.9混合试剂时应避免起泡。 7工作液准备 7.1 磺胺二甲嚅噬（SM2）标准品溶液：0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb 7.2浓缩洗涤液：用蒸僻水按1:20（1+19）稀释备用 7.3样本稀释液：备用 7.3显色剂：已备用，避免光线直照 7.4反应终止液：已备用 8样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应 准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存） 8.1取10g粉碎的样品，加20ml 70%甲醇溶液 8.2强力振荡3分钟 8.3用Whatman No 1滤纸过滤 8.4取25 [l l处理后的样品，加入25 [l l样本稀释液于反应孔中（样本稀释倍 数为2） 9酶免分析步骤 9.1实验须知 9.1.1实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温 （25 2 C），时间约 2小时。回温至室温（25 2 C）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于 2~8C十燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的精确度和准确度。 9.1.2使用后请立即将试剂放回2~8C保存 9.1.3请不要改变分析程序 9.1.4请使用精确的微量移液器 9.1.5操作一旦开始，请不要中断任何程序 9.1.6 ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求 操作 9.1.7为避免交义污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样 9.1.8加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面 9.2分析步骤 9.2.1预先进行编号，标记BCK标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测 9.2.2取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回 2~8C保存 9.2.3样品稀释液（10）、浓缩洗涤液（10）稀释成工作液（蒸僻水或去 离子水稀释） 9.2.4 在BC^L中加入50 l0.0 ng/ ml 标准品溶液 9.2.5在各标准孔中加入50^ l的标准品溶液 9.2.6在各样品孔中加入50从l样品溶液 9.2.7在所有孔中加入50 l的磺胺二甲嚅噬（SM2抗体酶结合物 9.2.8轻轻晃动反应板几秒钟。 9.3 37 C温浴30min （温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差