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学习情境紫外-可见分光光度法 子情景1 认知光的吸收定律 自然现象与物质的关系 设计仪器将其变为可视、可测量 确定检测方法 学习这一切 仪器分析方法出现的规律 一、光的基本特性 波动性 粒子性 ν = c λ 光电效应 E = hν = h c λ 光的能量和频率成正比 能量和波长成反比 (一)光的波粒二象性 P44 电磁波谱 光的颜色 复色光 单色光 互补色 (二)光的存在和相互作用 波谱区域的划分 微波 可见光、紫外光的波长范围分别为多少? 可见光:380-780nm 紫外光:200-380nm 二、物质对光的选择性吸收 暖洋洋 吸收光的能量 发生能量传递 光的吸收具有选择性 吸收黄色光 反射蓝色光 物质颜色的产生 吸收绿色光 透过紫色光 固体 液体 互补色 小视频 三、物质的吸收光谱曲线 番茄红素光谱图 邻二氮菲光谱图 不同波长的连续的单色光通过某一溶液,由于对不同波长光的吸收程度的不同而形成吸收曲线。 不同物质吸收曲线不同 相同物质吸收曲线形状相同,但吸收强度不同 不同浓度高锰酸钾吸收曲线 四、光吸收定律 b 1.吸收强度是否相同? 2.吸收强度可用什么来表示? 3.T的意义是什么? 光强度(I):单位时间(1s)内照射在单位面积(1cm2)的上光能量。 透射率(T):透过的光强度It与入射光强度I0之比,表示为: 吸光度(A):物质对光的吸收程度 A =-lgT It I0 T = T:0.00%~100%。 A:0.00~∞ T↑,A↓;反之, T ↓ ,A ↑。 I0 It A = - lgT = lg 朗伯-比尔定律 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系: A =K1 b 1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系: A = K2 c 二者的结合称为朗伯-比耳定律,其数学表达式为: A= k b c? 朗伯-比尔定律: A:吸光度; K:比例常数; b:吸收介质的厚度,一般以 cm 为单位; c:吸光物质的浓度,单位可以是 g/L 或 mol/L。 A= k b c? 光吸收定律表明什么? k? K-吸光系数 K—吸光系数,液层厚度为1cm的单位浓度溶液,对一定波长光的吸光度 k 越大,表示该物质对光的吸收能力越强 k 的两种表示方式:摩尔吸光系数 质量吸光系数 溶液以 mol/L 为单位, K为摩尔吸光系数(ε),单位L·mol-1·cm-1,A=εbc 例题 某化合物的λmax = 280 nm,光线通过该化合物的1.0×10-5 mol·L-1溶液时,透射率为50 %(用2cm吸收池),求该化合物在280 nm处的摩尔吸光系数。 解:已知, λmax = 280 nm,c = 1.0×10-5 mol·L-1, T = 50%,b = 2cm 则 A= - lgT = - lg 0.5 = 0.301 根据朗伯-比尔定律 A = ε·b·c ε= = 0.301/(2× 1.0×10-5 ) = 1.51×104(L·mol-1·cm-1) A bc 朗伯-比尔定律的适用范围 不仅适用于紫外光、可见光,也适用于红外光,不仅适用于均匀非散射的液态样品,也适用于微粒分散均匀的固态或气态样品。 应用吸收定律必须符合三个条件: (1)入射光为单色光; (2)被测样品必须是均匀介质; (3)吸收过程中,吸收物质之间不能发生相互作用。 多组分混合体系中,如果各组分分子之间不存在离解、聚合、化学反应等化学平衡时,其吸光度具有加合性,即: 朗伯-比尔定律的应用---吸光度的加合性 A 总λ = A1 λ + A2 λ + …A nλ 朗伯-比尔定律的偏移 理论上A与c的关系应是一条通过原点的直线 (截距为零),实际,有时非线性,有时不通过零点 1.0 0.5 0 A C 正偏离 负偏离 产生偏离的因素 1. 吸收定律本身的局限性 有限的定律,只有在稀溶液中才能成立。高浓通常 C 0.01mol/L),电荷分布会相互影响,改变对特定辐射的吸收能力 2.溶液的化学因素 吸光物质因离解、缔合,形成新的化合物,改变了吸光物质浓度 3.非单色入射光的影响 仪器造成 在高于某特定频率的 电磁波照射下,
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