玉米麸皮木聚糖降解酶基因挖掘与分子改良.pdfVIP

摘 要 木聚糖酶能够将半纤维素中木聚糖水解为单糖和寡糖，已广泛应用于多个领域。玉米的加工 副产物玉米麸皮作为重要的饲料原料，木聚糖含量丰富，但结构极为复杂，难以被传统木聚糖酶 降解。本研究以实验室保存的嗜酸黑曲霉Aspergillus niger MJ5 和购买的八株镰刀菌为材料，用 添加了玉米麸皮的盐离子培养基进行降解玉米麸皮木聚糖的产酶菌株筛选。以玉米麸皮木聚糖为 底物通过对培养液上清进行酶活力测定，发现嗜酸黑曲霉A. niger MJ5 和禾谷镰孢菌 Fusarium graminearum 2697 的培养液上清有较高的玉米麸皮木聚糖酶活性。根据基因组测序结果，从这两 株菌中筛选到15 个GH5 和GH10 家族的木聚糖酶基因，尝试克隆并在毕赤酵母中进行表达。 从A. niger MJ5 中克隆得到了11 个可能的GH5 和GH10 家族木聚糖酶基因，GH10 家族的木 聚糖酶基因 Anxyn10A 在毕赤酵母中表达后检测到玉米麸皮木聚糖酶活性。重组 AnXYN10A 最 适pH 为5.0，最适温度为60 °C，以小麦阿拉伯木聚糖为底物时其比活为2507 U/mg ，K