核酸探针检测技术.docxVIP

现代食品检测技术第二部分 第12章核酸探针检测技术 赵杰文邹小波 江苏大学食品与生物工程学院 第十二章核酸探针检测技术 1 核酸探针的种类及其制备方法 2 探针标记物与标记方法 3 探针杂交与信号检测 4 核酸探针在食品微生物检测中的应用 1核酸探针的种类及其制备方法 ?一、基因组DNA探针 ?二、cDNA探针 ?三、RNA探针 ?四、寡核苷酸探针 一、基因组DNA探针 ?这类探针多采用分子克隆或PCR技术从基因文库筛选或扩增方法制备。 二、cDNA探针 ?cDNA探针是以RNA为模板，在反转录酶的作用下合成的互补DNA，因此它不含有内含子及其他非编码序列，是一种较理想的核酸探针。 三、RNA探针 ?mRNA作为核酸分子杂交的探针是较为理想 四、寡核苷酸探针 ?用人工合成的寡聚核苷酸片段作为分子杂交的探针，其优点是可根据需要随心所欲地 合成相应的序列，避免了天然核酸探针中存在的高度重复序列所带来的不利影响 探针标记物与标记方法 ?一、核酸探针标记物种类及其特点 ?二、探针标记方法 ?三、探针的纯化 ?四、探针标记效率的评估 一、核酸探针标记物种类及其特点 ?标记探针的目的是为了跟踪探针的去向，确定探针是否与相应的基因组DNA杂交 一、核酸探针标记物种类及其特点 ?一种理想的探针标记物，应具备以下几种特性：1、高度灵敏性；；2、标记物与核酸探针分子的结合；；3、应不影响探针分子的主要