生物化学考研：王镜岩17蛋白质合成和基因工程-考研必备-学生物化学必备培训资料.ppt

生物化学考研：王镜岩17蛋白质合成和基因工程-考研必备-学生物化学必备;（二）遗传密码的破译 1953年 Dounce假设DNA通过RNA将信息传给蛋白质，RNA上每三个核苷酸形成一个“ 空洞”，正好将一个氨基酸装进去。该假说允许三联体的重叠。 1954年 物理学家Gamow与Teller等人合作，提出三联体不可重复。 1957年 Crick也提出了三联体的假说，提出要解决“天书”的“词法” 和“句法”，必须要有一本标准词典，认为64种组合中的44种是 “简并密码”。 1961年 Nirenberg, Matthaei Ochoa开始用生物化学手段破译密码，得到20种氨基酸的密码子的核苷酸序列。 1964年 Khorana合成了U和G交替的多聚核苷酸，合成的肽为VCVCVC，后来合成了UUGUUUGUUG…产生了poly(L), poly(C)和poly(V)，由此确定了一些密码子的核苷酸序列。 1964年 Nirenberg用合成的三联体与tNRA进行密码子－反密码子的碱基配对，并与核糖体结合，使密码破译的速度大大加快。 1966年 遗传密码的破译工作基本结束，Crick绘制了密码表，提出了摆动学说（wobble concept)，及时收回了“同义词”不存在的假设。 ;;;;过滤结合分析破译遗传密码;;二、遗传密码的基本特性 ;3.密码的变偶性;4.密码的通用性和变异性 ;5.密码的防错系统 密码子在密码表中的分布有一定的规则，通常，密码子的第二位决定氨基酸的极性，第三位决定密码子的简并性。 第二位的碱基是U则决定的氨基酸是非极性的； 第二位的碱基是C则决定的氨基酸是非极性的，或是不带电荷的极性氨基酸； 第二位的碱基是A或G则决定的氨基酸是极性的； 第一位的碱基是A或C，第二位的碱基是A或G则决定的氨基酸是极性的并具有碱性； 前两位的碱基是AG则决定的氨基酸是极性的并具有酸性。 这样的分布规律使碱基的变化有时不会引起氨基酸的变化，有时引起的氨基酸变化是同一类型的氨基酸相互取代，这样，合成的蛋白质功能差别不会太大。;第38章 蛋白质合成及转运 ;(二) tRNA转运活化的氨基酸至mRNA模板上 1.1957年Hoagland, M.B.发现一类稳定的RNA小分子，不与核糖体结合，因而不同于mRNA和rRNA。 2.Crick, F.比较了核酸和氨基酸的大小和形状后，认为不可能在空间上互补，因此预测：(1) 存在一类分子转换器，使信息从核酸序列转换成氨基酸序列；(2) 这种分子很可能是核酸；(3) 它不论以何种方式进入蛋白质翻译系统的模板，都必须与模板形成氢键（即配对）；(4) 有20种分子转换器，每种氨基酸一个；(5) 每种氨基酸必定还有一个对应的酶，催化与特定的分子转换器结合。 3.1963年，Ehrenstein等人用实验证明了Hoagland发现的分子就是Crick预言的分子转换器，即tRNA。 4.1965年Holley经过7年的努力测出酵母Ala-tRNA序列。; 1.早在本世纪30年代后期就发现细胞质和细胞核中都有核酸存在，不过用1924年福尔根发明的染色法只能使细胞核中的核酸染色。但两种核酸在260nm的吸收非常相似。 2.1941年，细胞学家J.Brachet和T.Caspersor注意到细胞质中的核酸与蛋白质的合成有密切的关系。 3.50年代有人用电子显微镜和物理化学手段发现大肠杆菌细胞质的RNA常常存在于蛋白质合成相关的颗粒中（Ф20nm,用35S进行脉冲式标记的实验证明该颗粒是蛋白质合成的所在地），简称核糖体。 4.核糖体得到分离后，发现含有RNA，即称rRNA。Watson等发现rRNA的G≠C，A≠U，断定是一单链分子。;大肠杆菌的7种核糖体RNA的操纵子;;;二. 翻译的步骤;;;(二) 每一个氨酰-tRNA合成酶可识别一个特定的氨基酸和与此氨基酸对应的tRNA的特定部位 ;氨酰-tRNA合成酶的辨认位点;4种tRNA的辨认核苷酸;碱基对的多种变化;(三) 一个特殊的tRNA启动了蛋白质的合成 ;大肠杆菌核糖体辨认的多种SD序列;(五) 蛋白质因子帮助蛋白质合成的起始 ;(六) 在氨基酸的掺人过程中有4个重复的延伸反应 ;转肽反应;(七) 核糖体反应中GTP的作用：肽链合成延伸反应中的进位和移位;EF-Tu和EF-G的结构：EF-Tu的三个结构域分别用红，绿和淡蓝色表示，淡紫色表示。 tRNAEF-G-tRNA的结构与EF-Tu-tRNA相似，二者竞争核糖体上的同一个结合部位。;(八) 翻译的终止需