可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量.docVIP

实验五 一、目的要求 1、掌握用分光光度法测定中药制剂中总黄酮含量。 2、掌握可见分光光度计的使用方法。 二、基本原理 大山楂丸由山楂、神曲和麦芽组成，主要功能为开胃消食，其中山楂主要成分为有机酸、黄酮类及多种维生素。 黄酮类化合物具有邻二酚羟基，或 3，5 位羟基结构，可与铝盐、铅盐、镁盐等金属盐类试剂反应，生成有色配合物，可用可见分光光度法测定其含量。 本实验利用黄酮类化合物在亚硝酸钠的碱性溶液中，与 Al3+产生高灵敏度的橙红色配合物（ λmax=510nm），从而用可见分光光度法（比色法）测定大山楂丸中总黄酮的含量。 三、仪器与试药 1、可见分光光度计、分析天平、索氏提取器。 2、乙醇（ A.R）、 5%亚硝酸钠溶液、 10%硝酸铝溶液、 1mol/l 氢氧化钠溶 液。 3、槲皮素（ xx 药品生物制品检定所）。 4、大山楂丸（市售品）。 四、操作步骤 1、标准液的配制： 精密称取槲皮素对照品 20mg，置 100ml 容量瓶中，加 95%乙醇 50ml 使溶解，然后加 50%乙醇稀释至刻度，即得 0.2mg/ml 的对照品溶液。 2、标准曲线的制备： 1 / 3 精密量取对照品溶液 0. 0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5.0ml，分别置于 10ml 容量瓶中，各加 50%乙醇溶液使成 5ml，精密加 入 5%亚硝酸钠溶液 0.3ml，摇匀，放置 6