GB 12292--- 水果、蔬菜汁 游离氨基酸含量的测.pdfVIP

中华人民共和国国家标准 水果、蔬菜汁 游离氨基酸含量的测定 GB 12292-90 Juice of fruits and vegetables一 Determination of free amino acid 1主题内容与适用范围 本标准规定了水果、蔬菜汁中游离氨基酸的提取净化及测定方法。 2 测定原理 水果、蔬菜汁通过阳离子交换树脂，固定及净化氨基酸。用2 mol/L氢氧化铁把氨基酸洗脱后， 脱氨浓缩。用氨基酸分析仪测定含量。 3 仪器设备 3.1氨基酸分析仪或高压液相色谱仪。 3.2玻璃柱，高20cm，内径gems 3.3捣碎机， 3.4 离心机; 3.5 天平; 最新文献资料 3.6旋转蒸发器。 3.7真空卜燥器。 4试剂 全部试剂均为分析纯，配制试剂均用去离子水。 4 . 东 4 . ， : ‘ 月 4 . . . ‘ 阳离子交换树脂，Dowex 50Wx 4型，100一200目，或其他适宜的树脂。 盐酸溶液 6mol/L, 0.1mol/Lo . 山 口 ﹃ ， 月 曰 氢氧化钱溶液 2 mol/Lo 氢氧化钠溶液 3.5mol/L。 每种氨基酸标准溶液 0.0025iMo 仪器分析用的各种缓冲液。 4.7 仪器分析用的荀三洲pi试剂。 试样选取和制备 5.1液体产品 需充分混匀。 5.2固体产品 选取有代表性的水果和蔬菜洗净，擦于，剥去或削去果皮，用四分法取样1509左右。 5.3称样 称取样品100-1509,准确至0.019,置于捣碎器的玻璃缸内，加人等量的水。 5.4样品捣碎 将A样品的玻璃缸装在捣碎机上，在1档速度捣碎1 min，取出倒人烧杯中。 5.5过滤及离心 把已捣碎的样液过滤，吸取lo m L滤液放人离心管中，在4000r/min的转速下离 已g5mino 国家技术监督局1990一03一29批准 1990一12一01实施 GB 12292-90 5.6脱果胶 对含果胶丰富的样液需用乙醉处f9,准确吸取样液5mL，加人34mL96%乙醇，过滤， 用15mL80%乙醉分三次冲洗滤纸，将滤液在35℃下减压蒸馏。 6 分析步骤 6.1固定柱的装置 将Dowex 50WX 4树脂装人玻璃圆柱咋:，离上端空出约10cm，用6 mol/L 盐酸250 m L活化树脂，然后用水洗至无氯离子为止(用硝酸银检查，不产生白色沉淀)。调节活塞， 使溶液流速为1 mL/mi n. 6.2 Wl定及洗脱 吸取5 mL样液或液体产品，除果胶物的样液则取全部，置玻璃圆柱【}】，再加5mL 水，待液体通过树脂后再加2mol/L氢氧化铁50mL，可分3一‘次加完，用50-L水洗涤，将加 2mol/L氢氧化铁流出的溶液收集在圆底烧瓶内，在减压真空和加热((40一450C)条件下蒸发至卜， 用5mL0.1mol/L盐酸溶解。 6.3脱氨 吸取待测液1mL，加人3.5mol/L氢氧化钠溶液2一3滴，调至p H 10.11,放在真 空F-燥器中减压蒸F..用ImL水洗涤，再抽真空蒸Ve这样重复2次，加人pH2.2缓冲液0.5-L 和。.1moI/L盐酸0.5 m L，使pH达到2.2.丙稀释5一10倍后测定。 6.4测定 用氨基酸分析仪测定氨基酸含量，测定前需做2一3个氨基酸标样，待仪器稳定后再测 试样。 了 结果计算 7