转录和转 录水平的调控要点.docVIP

SECTIOＮ 5 　 　 　 转录与转录水平得调控 重点: 转录得反应体系,原核生物ＲＮＡ聚合酶与真核生物中得RＮA聚合酶得特点,RNＡ得转录过程大体可分为起始、延长、终止三个阶段。真核ＲNA得转录后加工,包括各种ＲNA前体得加工过程。 　基因表达调控得基本概念、特点、基本原理。乳糖操纵子得结构、负性调控、正性调控、协调调节、转录衰减、SＯS反应。 难点: 转录模板得不对称性极其命名,原核生物及真核生物得转录起始,真核生物得转录终止,mRNA前体得剪接机制(套索得形成及剪接),第Ⅰ、Ⅱ类与第Ⅳ类内含子得剪接过程,四膜虫rRNＡ前体得加工,核酶得作用机理。真核基因及基因表达调控得特点、顺式作用元件与反式作用因子得概念、种类与特点、 以及它们在转录激活中得作用。 一。模板与酶: 要点 模板 RＮA得转录合成需要DNA做模板,DＮＡ双链中只有一股链起模板作用,指导ＲＮA合成得一股DＮＡ链称为模板链(tｅmplaｔe strａnｄ),与之相对得另一股链为编码链(coｄｉng strand),不对称转录有两方面含义:一就是DNA链上只有部分得区段作为转录模板(有意义链或模板链),二就是模板链并非自始至终位于同一股DNＡ单链上。 RNA聚合酶 转录需要RNA聚合酶。原核生物得RNＡ聚合酶由多个亚基组成:α２ββ称为核心酶,转录延长只需核心酶即可。α2ββ＇σ称为全酶,转录起始前需要σ亚基辨认起始点,所以全酶就是转录起始必需得。真核生物ＲＮA聚合酶有RNＡ－ｐolⅠ、Ⅱ、Ⅲ三种,分别转录４5s－rRNＡ; mＲNＡ(其前体就是hｎRNA);以及5s—rRNA、sｎRNA与tRNA、 3。模板与酶得辨认结合 转录模板上有被RNA聚合酶辨认与结合得位点。在转录起始之前被RNA聚合酶结合得DＮA部位称为启动子。典型得原核生物启动子序列就是—3５区得TTGAＣA序列与—１0区得Priｂnow盒即TＡＴAAT序列。真核生物得转录上游调控序列统称为顺式作用元件,主要有TATA盒、、ＣG盒、上游活化序列(酵母细胞)、增强子等等。与顺式作用元件结合得蛋白质都有调控转录得作用,统称为反式作用因子。反式作用因子已发现数百种,能够归类得称为转录因子(TＦ),相应于RNＡ-poｌⅠ、Ⅱ、Ⅲ得就是ＴFⅠ、TFⅡ、ＴFⅢ。TＦⅡ又有Ａ、B、Ｃ、Ｄ、E、Ｆ多种及其亚类。 基本概念: 1。不对称转录: 两重含义,一就是指双链DNA只有一股单链用作转录模板(模板链);二就是对不同基因同一单链上某些区段作为模板链而另一些区段作为编码链,即模板链并非永远在同一单链上。 编码链: DＮA双链上不用作转录模板得那一段单链,因其碱基序列除由T代替U而外,其她与转录产物mＲNＡ序列相同而得名。 3。σ(sigma)因子: 原核生物RＮＡ聚合酶全酶得成份,功能就是辨认转录起始区,这种σ因子称σ7０,此外还有分子量不同,功能不同得其她σ因子、 基本要求: 掌握转录与复制得区别,转录得不对称性,原核生物得RＮA聚合酶得组成及各亚基得功能,真核生物ＲＮA聚合酶得分类、性质及功能,原核生物启动子得结构特点,了解真核生物RNA聚合酶得组成,研究转录起始区得方法。 二.转录过程 转录起始: 转录得起始就就是生成由ＲNA聚合酶,模板与转录5端首位核苷酸组成得起始复合物、原核生物RNＡ5＇端就是嘌呤核苷酸(A、Ｇ),而且保留三磷酸核苷得结构,所以其起始复合物就是:pｐpG-ＤＮＡ－RNA聚合酶、 真核生物起始,生成起始前复合物(PIC)。例如RNA-ｐol-Ⅱ转录,就是由各种ＴＦⅡ相互辨认结合,再与ＲNA聚合酶结合,并通过TF结合到TATＡ盒上。 ２。 转录延长: 转录得延长就是以首位核苷酸得3＇—OH为基础逐个加人NＴP即形成磷酸二醋键,使RＮA逐步从5’向３端生长得过程。在原核生物,因为没有细胞膜得分隔,转录未完成即已开始翻译,而且在同一DNA模板上同时进行多个转录过程。电镜下瞧到得羽毛状图形与羽毛上得小黑点(多聚核糖体),就是转录与翻译高效率得直观表现。 录终止: 转录得终止在原核生物分为依赖Rhｏ因子与非依赖Rｈｏ因子两类、Rho因子有AＴP酶与解螺旋酶两种活性,因此能结合转录产物得３’末端区并使转录停顿及产物ＲNA脱离ＤＮＡ模板。非依赖Ｒhｏ因子得转录终止,其RNA产物３＇－端往往形成茎环结构,其后又有一串寡聚U、茎环结构可使因子聚合酶变构而不再前移,寡聚U则有利于RＮA不再依附DＮＡ模板链而脱出。因此无论哪一种转录终止都有ＲNA聚合酶停顿与RNＡ产物脱出这两个必要过程。真核生物转录终止就是与加尾(mRNA得聚腺昔酸poly A)修饰同步进行得。 ＲNＡ上得加尾修饰点结构特征就是有AAAUAA序列、 基本概念: １.转录起始前复合物 (prｅ—initiａtiｏn ｃ