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分子酶与酶工程;课程介绍;微生物是地球上重要的可再生资源,有着重要的应用价值。;;;1.1 关于酶Enzyme;酶是一类特殊的催化剂;酶具有高度的底物识别能力和产物的定向能力;;;Temperature classes;12;13;Industrial application of thermophily;;;;;;
1982年Cech小组发现RNA本身可以是一个生物催化剂,称之为核酶Ribozyme。
事先设计好的过渡态类似物为半抗原,按一般单克隆抗体制备程序获得具有催化活性的抗体。称之为抗体酶Abzyme。;;;23;;1.2 关于酶工程Enzyme Engineering;;;;生物酶工程则是以酶学和以基因重组技术为主的现代分子生物学技术??结合的产物,
主要包括:
①用基因工程技术大量生产酶(克隆酶);
②修饰酶基因产生遗传修饰酶(突变酶);
③设计新的酶基因,合成自然界不曾有的新酶。;1.3 分子酶学工程(Molecular Engineering);分子酶学工程的概念 ;改进,模拟,设计;分子酶学工程的概念;分子酶学工程的出现表明人们已经按照自己的意图来改进、模拟和设计新酶并且正在有效地把工程酶应用于经济建设和科学技术研究中去。;分子酶学工程的基本策略和方法;分子酶学工程的基本策略和方法;分子酶学工程的基本策略和方法;分子酶学工程的基本策略和方法;分子酶学工程的基本策略和方法;工程酶的分类 ;1.4 酶与酶工程的研究趋势;1、酶的结构与功能的研究:;2、生物催化过程的研究:;过程;
生物催化过程又是典型的高度不均一过程,理论上
需要特殊设计的硬件部分,
需要有高催化效率的生物催化剂,
需要实施计算机控制的软件,
需要能降低成本的回收和再利用技术,
这是生物催化过程,尤其是工业生物催化的四个“必需”。;3、改造酶的催化特性及新酶设计 ;;;定位突变和定向进化两种方法各有优缺点,如果将两者组合,会出现优势互补。
试验已经证实,定向进化方法可以有效地扩大定位突变,定位突变可以把关键氨基酸或结构片段引入酶分子中,这是定向进化办不到的。
反之,定向进化也可以与定位突变结合起来,用定位限制随机以减少筛选的库容;用随机扩大定位以增加突变位点。此方法是通过控制合成的底物和浓度比例来实现碱基对的错配。;;核酶可催化四种反应。除RNA有催化活性外,近年来发现DNA也有酶活性,此外还发现RNA具有催化自身复制的功能。
RNA具有信使编码功能与催化功能,实现遗传信息的复制、转录和翻译,是生命进化中最简单、最经济的与催化自身复制加工的RNA世界的原始方式,这种高度序列特异的核酶很大的应用价值。;4、 应用酶工程;能够在250~350?C条件下生长的嗜热微生物,
能够在-10~0?C条件下生长的嗜冷微生物,
能够在pH2.5条件下生长的嗜酸微生物,
能够在pH11条件下生长的嗜碱微生物,
能够在101.325MPa下生长的嗜压微生物,
以及在高温(105?C)和高压(40.53MPa)条件下生长的嗜热嗜压微生物等。;;55
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