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常用免疫组化试剂介绍 一、用于鉴别诊断 ( 一 ) 上皮源性： 1. 细胞角蛋白 /cytokeratin.CK ： 目前，商品化的细胞角蛋白有 20 多种，不同的分子量代表不同类型的上皮标志。通常将 CK 分为两大类型：Ⅰ型（低分子量）；Ⅱ型（高分子量）。理论上讲，大多数单层上皮表达低 分子量的 CK；复层上皮多表达高分子量的 CK；移形上皮（膀胱）和假复层上皮（呼吸道的被 覆上皮）既表达低分子量的 CK，也表达高分子量的 CK。 在癌组织中，低分子量的 CK多在腺癌中表达，高分子量的 CK多在鳞癌中表达。目前为止， 未发现任何一种上皮只含有一种 CK，某些上皮可含 2-10 种不同分子量的 CK。因此，目前试 图应用单一的 CK免疫表型来确定某种特定的上皮性肿瘤是不可能的。同样，应用 CK来区别 腺癌、类癌和间皮瘤也是困难的。因此， CK的免疫组化结果判断是一个较为复杂的问题，在 应用这类标记物作为腺癌和鳞癌的鉴别应特别注意。 有必要时， 应联合用多种 CK加以综合判 断。 CK的阳性表达还包括有间变癌、双向分化的滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉 瘤、胸腺瘤等。 CK的阴性表达有：副节瘤单向分化的滑膜肉瘤、软骨（肉）瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜 瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤（除特殊类型外）。 在判断 CK免疫组化结果时应注意几点： （ 1） CK 的单克隆抗体优于多克隆抗体； （ 2） CK 常出现斑点状的假阳性反应，应注意识别； 3） 虽然大多数 CK多在胞浆表达，但 CK17多在胞核表达； 4） 绝大多数 CK抗体需用胰酶消化，可增加阳性表达率和染色强度； （ 5） 部分非上皮性肿瘤（平滑肌肉瘤）可见有 CK表达，在诊断时应注意； （ 6） 淋巴结、 扁桃体和脾组织中的滤泡外的网织细胞含有 CK8和 18 以及 desmin, 在判断淋 巴结转移癌和肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断。 2. 上皮膜抗原（ epithelial membrane antigen/EMA ）： EMA是上皮细胞分泌的一种乳脂小球膜糖蛋白，广泛存在于人体各种上皮细胞中（也存在于 间皮细胞、浆细胞、组织细胞和 T 细胞淋巴瘤中），其分布与角蛋白相似，但对内脏腺上皮 优于细胞角蛋白，尤其是分化差的癌 EMA有时可呈强阳性表达。 EMA可作为上皮源性肿瘤的常用标记物。 EMA阳性表达的肿瘤有鳞癌、胃肠道腺癌、乳腺癌、 前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、滑膜肉瘤、甲状腺乳头状癌、上皮样肉瘤等。 在判断 EMA免疫组化结果时应注意几点： （ 1） EMA虽然是上皮细胞非常敏感的标记， 但一些非上皮性肿瘤 （如浆细胞、 组织细胞和 T 细胞淋巴瘤）也可阳性表达。因此在癌和其他间叶性肿瘤鉴别时不能作为唯一的参考标记； 2） EMA 对内脏上皮源性肿瘤的敏感性优于体表上皮源性肿瘤，因此在腺癌中的表达明显高于鳞癌。 桥粒蛋白：是上皮细胞特有的结构，是一种广谱的上皮性标记。鳞癌、腺癌、移形细胞癌、未分化癌和间皮瘤、尤文氏肉瘤表达。 在判断桥粒蛋白免疫组化结果时应注意几点： （ 1） 桥粒蛋白也可在心肌、脑膜瘤、卵巢的颗粒细胞瘤和淋巴结的网织细胞中表达； （ 2） 甲状腺间变癌阳性表达率低； （ 3） 冰冻切片效果优于石蜡切片。 （二）间叶源性肿瘤的标记 1. 波形蛋白 Vimentin ： 是一种 52-58 的胞浆蛋白。主要分布于间叶细胞及其起源的肿瘤，是间叶细胞及其肿瘤的特 异性标记。横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤和非肌源性软组织肿瘤如纤维肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉 瘤、恶纤组、精原细胞瘤、雪旺氏瘤和骨肿瘤 Vimentin 是一个关键标记。此外，血管球瘤、 颗粒细胞肌母细胞瘤、淋巴瘤、白血病和恶黑等均可有 Vimentin 表达。 在判断 Vimentin 免疫组化结果时应注意几点： （ 1） 部分肿瘤（如间皮瘤、滑膜肉瘤、乳腺癌、肺腺癌等）除 Vimentin （ +）表达外，可 同时又有 cytokeratin 的表达。应结合其组织学形态加以诊断。 2） 福尔马林固定的组织标本， vimentin 假阴性并不少见， 冰冻切片酒精固定的组织可提高其敏感性和可靠性； 3） vimentin 不能单独用于软组织肿瘤的诊断，多提倡与其他特异性标记物联合使用。 2. 结蛋白 desmin ： 是一种分子量为 50-55ku 的细胞浆蛋白，胚胎和成人横纹肌或平滑肌及其肿瘤均可表达。子 宫、皮肤、胃肠道及其他部位的平滑肌多呈（ +）表达。现已发现 desmin 在良性肿瘤的阳性 率和染色强度明显高于恶性肿瘤；高分化的平滑肌肉瘤和染色强度明显高于低分化的平滑肌 肉瘤。 Suster 报道 5 例皮肤是上皮性平滑肌肉瘤均为 （ - ），而 ac