现代遗传学分析探究技术的临床应用.docxVIP

摘要和关键词 近年来，遗传分析技术已广泛用于复杂疑难疾病的诊断、新生儿及高危人群疾病 的筛查、植入前诊断、遗传病再发风险评估及基因治疗,临床医师需更好地了解使用 遗传分析技术的目的和时机,理解这些技术的优势及局限性,才能真正将遗传分析技 术合理应用于临床实践中，为提高遗传病的诊治能力和水平提供帮助。 遗传分析；基因测序；基因变异；基因突变 生命的繁衍、凋亡及疾病，均是生命个体的遗传信息自身或环境因素 变化导致机体分子、细胞、组织、器官发生改变的结果。因此，从分析遗 传信息变化入手，不仅可认识人类生命的自然规律，也可发现改变生命轨 迹的异常现象。近年来，随着分子生物学的迅猛发展，曾经困扰认知遗传 信息在生命进化及疾病发生机制的障碍正被逐一清除。分析遗传信息变化 （DNA变异、RNA转录、蛋白表达）技术手段和方法的不断涌现，使得遗 传学分析技术不再仅停留在研究疾病的遗传病理机制，信号通路方面已快 速、大量地引入到临床实践中，直接为复杂疑难疾病诊断、新生儿筛查、 高危人群疾病筛查、辅助生殖、遗传病再发风险评估及基因治疗提供帮助。 但是，这些技术的应用本身具有适用范围、存在一定的局限性，不能解决 所有的医学难题，不能替代现有的临床分析诊断技术。因此。临床医师如 何合理应用这些技术，认识疾病的发生机制、提高诊断能力和水平、减轻 家长焦虑和降低经济负担是当前应解决的实际问题。近年来，国内外也出 版了遗传检测临床应用的专家共识-3］，但是对临床医师从实用角度的帮助 和指导还远远不够。现就遗传检测涉及的相关遗传基础进行回顾，重点分 析临床常用的遗传分析技术应用的范围、优势及不足，并对未来遗传检测 在儿科领域的发展方向进行介绍，以期为临床医师合理运用遗传分析技术 提供帮助。1疾病的遗传学基础 临床医师准确合理地把任何一项遗传 学分析技术应用在临床实践中，需要了解与疾病或表型密切相关的遗传基 因的结构功能变化，需要把握几个重要的遗传学基础。 任何2个不同个体在其细胞核DNA序列99.9%均是完全相同的,仅 0.01%的DNA序列存在变化，这些DNA变异对表型的影响方式有3种： （1 ） DNA变异对表型无影响；（2 ） DNA变异直接导致疾病表型岀现； （3） DNA变异如果介于前面2个极端之间，变异虽然导致人类个体表型 的变化，但不是病理性的，称之为表型变异。因此，遗传病是遗传变异的 极端表现，有遗传变异也不一定造成临床异常的结局。 DNA序列分为编码区序列（称为外显子）和非编码区序列（称为内 含子）。外显子通过转录把遗传信息传递给信使RNA（ mRNA ）,然后 mRNA指导形成有功能活性的蛋白质发挥生理作用。在转录过程中，尽管 大片段的非编码DNA均会在剪切位点被剪切掉，但是因为在这些非编码区 内存在转录启动子、转录增强子及调控区特殊DNA序列，所以这些非编码 DNA序列，同样可影响上下游的外显子遗传信息的转录转导，对基因功能 也会产生重要影响。 突变即核苜酸序列的改变，影响临床表型的突变多发生在外显子区 域，也可发生在连接外显子和内含子的剪切位点及上下游基因的调控区， 间接影响蛋白的合成和功能。临床上，遗传结构变化导致的疾病分为单基 因病和多基因病。绝大多数遗传性疾病是因为单基因微小结构变异（符合 孟德尔遗传规律）致病，少部分属于多基因改变（如染色体异常），目前， 这2类遗传物质变化均可用遗传学技术进行分析。单基因病发生有不同的 遗传方式及不同的基因变异类型。遗传方式包括常染色体显性遗传、常染 色体隐性遗传、X染色体显性遗传、X染色体隐性遗传、Y染色体遗传及线 粒体遗传。目前已经明确突变类型包括错义突变/无义突变。多基因病主要 是因为染色体大片段异常（包括染色体数目、长短臂片段缺失或重复，或 染色体结构发生重排），涉及多个基因功能异常而致病。 基于这些遗传特性，目前的遗传诊断方法可用简单的生化检查如17- 羟孕酮（17-H0P ）诊断21-羟化酶缺乏,也需要用较复杂的染色体核型分 析来诊断特纳综合征（45 , X ）或克氏综合征（47 , XXY ）。近年来，分子 核型分析技术，如比较基因组杂交技术（aCGH ）也已作为一线诊断技术， 不仅可分析染色体的数目异常，也能用于染色体微缺失/微重复的检测。 对于基因序列分析也有多项技术方法可选择。简单的有针对特异突变 位点分析，只是特异性检测某个基因的特异性突变位点（如软骨发育不全， 99%的FGQQ3基因突变发生在G1138C的单位点突变，对临床诊断的患者 检测该位点即可确诊绝大多数病例）。近年来新一代测序技术（NGS ）在 临床的广泛应用，推动了遗传性疾病诊治能力的提高。2遗传分析的指征、 目的与知情同意 临床医师在准备对患者进行遗传检测时，必须有2个 预判：一是推断遗传因素参与了疾病的发生