柯萨奇病毒的rt-pcr实验.ppt

柯萨奇病毒的RT-PCR实验室诊断;属于小ＲＮＡ病毒科肠道病毒属，最易在灵长类动物细胞中生长。 病毒分为Ａ、Ｂ两组。柯萨奇病毒Ａ组有２３个血清型，柯萨奇病毒Ｂ组有６个血清型。;柯萨奇病毒(Coxsackie virus，CV ) 的诊断方法： 病毒分离、动物接种 操作烦琐, 成功率低, 影响诊断的敏感性； ELISA 法 检测患者血清中相应的特异性IgM 、 IgG抗体, 但不能获得有关病毒更多的信息； RT - PCR 法 既可以通过检测病人样本中的病毒RNA 来明确诊断, 也可以通过进一步的测序来分析病毒流行株特定序列, 为基因分型提供依据。;两端为保守的非编码区，中间为编码区。5’端共价结合一小分子蛋白质Vpg（约7kDa），与病毒RNA合成和基因组装配有关；3’端带有polyA尾。编码区编码的病毒结构蛋白VP1～VP4，VP1、VP2和VP3均暴露在病毒衣壳的表面，有中和抗原位点；VP4位于衣壳内部，一旦病毒VP1与受体结合后，VP4即被释出，衣壳松动，病毒基因组脱壳穿入。;逆转录PCR，或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR)，是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”，由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成。一条