洁净室区沉降菌检测统一标准操作作业规程.docxVIP

名称：洁净室（区）沉降菌测试标准操作规程 共 6 页 编号：SOP-QC-002 版本号：00 起草: 日期： 变更原因： 审核: 日期： 同意: 日期： 实施日期： 颁发部门：质量确保部 分发部门：质量总监、质量确保部、质量控制部 目标 制订标准洁净室（区）沉降菌测试方法，指导沉降菌测试工作。 范围 适适用于洁净室（区）沉降菌测定和验证。 责任 QC微生物室检验员负责洁净室（区）沉降菌测试，QC主管和QA部门负责对测试数据进行统计分析。 程序 定义 菌落：微生物培养后，由一个或多个微生物繁殖而形成微生物集落，简称CFU。 沉降菌：经过自然沉降原理搜集在空气中活微生物粒子，经过专用培养基，在适宜条件下让其繁殖到可见菌落数。 动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态设备在指定方法下进行，而且有指定人员根据规范操作状态。 测试方法 测试过程 设备和培养基：恒温培养箱、购置预灌装TSA平皿或自制TSA平皿。 测试条件 洁净室（区）温度和相对湿度应和其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18~26℃，相对湿度在45%~65%为宜）。 风速、压差应在合格范围内。 动态测试。 测试方法 将准备好培养皿按采样点要求放置或放在沉降架上（约1.0m）。将采样台面取样位置或采样辅助设施表面消毒，打开培养皿，将培养皿盖置于已消毒位置，将培养皿置于培养皿盖上，使培养基表面充足暴露后，将培养皿盖盖上后倒置。 在每一只培养皿上标识好具体取样位置及取样日期，将全部培养皿在QC微生物室进行培养观察。 培养观察计数 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，在20~25℃培养箱中培养3天，30~35℃培养箱中培养2天后观察计数。 每批培养基应有阴性对照试验，检验培养基础身是否污染。可每次选定2只培养皿作对照培养。 计算 平均菌落数= eq \f(M1＋M2＋…Mn,n) M1＝1号培养皿菌落数 M2＝2号培养皿菌落数 Mn＝n号培养皿菌落数 n＝培养皿总数 结果判定 最终止果采取平均值。但每个碟菌落数亦不得多于标准要求。 如有一个碟菌落数超出标准要求，平均却符合要求，也以不合格论。 静态测试时，若某洁净室（区）内平均菌落数超出评定标准，则必需对此区域优异行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 注意事项 若培养皿上有2个或2个以上菌落重合，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 采取一切方法预防人为原因对样本污染。 因为细菌种类繁多，差异甚大，计数时通常见透射光于培养皿后面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并须注意细菌菌落和培养基沉淀物区分，必需时用显微镜判别。 采样前应仔细检验每个培养皿质量，如发觉变质、破损或污染应剔除。 对于沉降菌测试，符合最少采样点数时，还必需符合最小培养皿数。最少采样点数和最少培养皿见附表。 日常监控 对于沉降菌监控，宜设定纠偏限和警戒限 ，以确保洁净室（区）微生物浓度受到控制。应定时检测以检验微生物负荷和消毒剂效力，并做趋势分析。静态动态监控全部能够采取此方法。 对于沉降菌取样频次。假如出现下列情况应考虑修改，在评定以下情况后，也应确定其它项目标检测频次： 连续超出纠偏限和警戒限 停工时间比估计长 关键区域内发觉污染存在 在生产期间，空气净化系统进行任何重大维修 日常操作统计反应出倾向性数据 消毒规程改变 引发生物污染事故等 当生产设备有重大维修或增加设备时 当洁净室（区）结构或区域分布有重大变动时 洁净车间采样点分布图详见《洁净区洁净度监控管理规程》。 微生物试验室采样点分布图详见《微生物试验室环境测试规程》。 相关文件和统计 序号 文件/统计名称 文件/统计编号 备注 1 沉降菌测试统计 SOP-QC-002a-00 2 洁净区洁净度监控管理规程 SMP-QA-015 3 微生物试验室环境测试规程 SMP-QA-031 变更 /修订统计： 原版本 生效日期 此次变更/修订原因、依据及具体变更内容 附图： 最少采样点数目 面 积 m2 洁 净 度 级 别 A级 C级 D级 10 2~3 2 2 ≥10～ 20 4 2 2 ≥20～ 40 8 2 2 ≥40～ 100 16 4 2 ≥100～ 200 40 10 3 ≥200～ 400 80 20 6 ≥400～ 1000 160 40 13 ≥1000～ 20XX 400 100 32 ≥20XX 800 200 63 注：对于A级单向流洁净室（区），包含A级工作台，面积指是送风口表面积。对于C级以上非单向流洁净室（区），面积指是指房间面积。 沉降菌测试统计 编号：SOP-QC-002a-00