美白实验（鱼胚实验）实验方法-团体标准.pdfVIP

团 体 标 准 标准编号： 化妆品 美白实验（鱼胚实验）实验方法 xxxx-xx-xx 发布 xxxx-xx-xx 实施 XXXX 发布 目 次 前言3 化妆品 美白实验（鱼胚实验）实验方法4 1. 范围4 2. 定义4 3. 规范性引用文件4 第一法 显微观察法4 4. 检测原理4 5. 实验材料与试剂4 6. 实验仪器与设备 5 7. 实验步骤 5 8. 实验结果 6 9. 质量控制 6 第二法 黑色素生成抑制检测法7 10. 检测原理7 11. 实验材料与试剂 7 12. 实验仪器与设备8 13. 实验步骤8 14. 结果计算10 15. 质量控制10 第三法 酪氨酸酶活性抑制检测法10 16. 检测原理10 17. 实验材料与试剂10 18. 实验仪器与设备11 19. 实验步骤11 20. 结果计算13 21. 质量控制13 22. 补充文件13 前言 本标准按照GB/T 1.1-2020 给出规则起草。 本标准提出和归口： 本标准起草单位： 本标准主要起草人： 化妆品 美白实验（鱼胚实验）实验方法 1. 范围 本标准规定了化妆品美白功效的斑马鱼鱼胚实验的实验原理、实验准备、 实验方法和实验结果。 第一法为显微观察法，适用于液态水基类、膏霜乳液、凝胶类、可溶性粉 剂化妆品原料及其产品的美白功效定性观察。 第二法为黑色素生成抑制检测，适用于液态水基类、膏霜乳液、凝胶类、 可溶性粉剂化妆品原料及其产品美白功效定量检测。 第三法为酪氨酸酶活性抑制检测，适用于液态水基类、膏霜乳液、凝胶类、 可溶性粉剂化妆品原料及其产品美白功效定量检测。 2. 定义 hours post-fertilization （hpf ）：受精后小时数 3. 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅 注日期的版本适用于本文件，凡不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所 有的修改单）适用于本文件。 化妆品安全技术规范2020 版 GB/T 6678 化工产品采样总则 GB/T 6679 固体化工产品采样通则 第一法 显微观察法 4. 检测原理 受试样品配置成溶液孵育鱼胚72h 后，于体式显微镜下观察，可根据黑色 素在鱼胚体表的沉积，观察到黑色素含量的变化。 5. 实验材料与试剂 5.1. 材料 5.1.1. 斑马鱼交配盒 5.1.2. 鱼胚收集器 5.1.3. 细胞培养板：6 孔细胞培养板 5.2. 试剂 5.2.1. 二甲基亚砜 5.2.2. 二甲基亚砜标准储备液（1%）：量取二甲基亚砜标准品1.0mL （精确至 0.1ml ），用斑马鱼系统养殖水稀释并定容至100mL 容量瓶，于28℃保存。 5.3. 对照品 5.3.1. 熊果苷标准品，纯度≥98%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物。 5.3.2. 熊果苷标准储备溶液（1mg/mL ）：称取熊果苷标准品10mg （精确至 0.01mg