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转录的大概过程
如图所示:一个真核生物基因的转录需要 3至5个转录因子。转录因子之间互相结
合,生成有活性和专一性的复合物,再与 RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应
的基因。
一、 转录起始
转录的起始就是生成由 RNAM合酶,模板和转录5端首位核昔酸组成的起始复合物。
原核生物RNA5端是喋吟核昔酸(A、G),而且保留三磷酸核昔的结构,所以其起始
复合物是:ppp『 DN/V RN麻合酶。
真核生物起始,生成起始前复合物( PIC)。例如,RN4 pol —II转录,是由各种
TFH相互辨认结合,再与 RNA聚合酶结合,并通过 TF结合到TATA^上。
二、 转录延长
转录的延长是以首位核昔酸的 3 - OH为基础逐个加入 NTP即形成磷酸二酯键,使
RNA逐步从5向3端生长的过程。
在原核生物,因为没有细胞膜的分隔,转录未完成即已开始翻译,而且在同一 DNA
模板上同时进行多个转录过程。电镜下看到的羽毛状图形和羽毛上的小黑点(聚多核糖
体),是转录和翻译高效率的直观表现。
三、 转录终止
转录的终止在原核生物分为依赖 Rho因子与非依赖 Rho因子两类。Rho因子有ATP
酶和解螺旋酶两种活性, 因此能结合转录产物的 3末端区并使转录停顿及产物 RNA兑离
DNA模板。非依赖 Rho因子的转录终止,其 RNAT物3一端往往形成茎环结构,其后又有一串寡聚U。茎环结构可使因子聚合酶变构而不再前移,寡聚 U则有利于RNM再依 附DNA莫板链而脱出。
因此,无论哪一种转录终止都有 RNA聚合酶停顿和RNA产物脱出这两个必要过程。
真核生物转录终止是和加尾( mRNA勺聚腺昔酸poly A)修饰同步进行的。 RNAk的 加尾修饰点结构特征是有 AAAUA痔列。
一些基本概念的理解:
转录起始前复合物(PIC):是真核生物转录因子与 RNA聚合酶一同结合于转录起始前的 DNAE域而成的复合物。
加尾修饰点:真核生物mRNA专录不是在 mRNA勺位置上终止,而是在数百个核昔酸之后,
研究发现在编码链读码框架的 3端之后,常有一组共同序列 AATAAA再下游还有相当多 GC的序列,这些序列称为加尾修饰点,转录越过修饰点后, mRNAfe修饰点处被切断,随
即加入polyA。
Rho因子:是原核生物转录终止因子,有ATP酶和解螺旋酶活性。转录终止也可不依赖 Rho
因子。
【相关例题】
1. (18分)某些植物在进化过程中已经形成抵抗干旱、低温和高盐等逆境的调 控机制,感受并响应各种外界刺激。转录因子 OrERF是一类蛋白质,在植物
抵抗逆境时发挥重要作用。科研人员对水稻 OrERF?因进行系列研究。
(1)科研人员对水稻OrERF基因上游部分中的转录非模板链进行测序,结果如
下:
……^rriCXAAAATALAKMCTA^cn,— AAAITTCG^J AI ―- TCCATGTGCTG…… -f- ~r~ , ~r
①高盐诱导无件②干早鹿答无件③慨温应答元件 转录成起始密码子
OrERF基因转录出的 mRNA中的起始密码子是 。①②③三
个元件分别在高盐、干旱、低温不同信号的诱导下,导致此基因表达出不同
的OrERF?白,以适应高盐、干旱、低温环境,此现象说明
(2)科研人员欲将水稻OrERF基因导入拟南芥体内,获得抗逆性强的植株,设
将OrERF
将OrERF基因插入
染色体的DNA+
拟南芥细胞表现出新性状的植株
Q芝◎罕—
T-DNA (IeERF环因含。rERF基囚含重坦质粒的 重指质粒 农杆菌
可利用 技术获得并扩增此基因。将此基因与 结合后导
入农杆菌体内,通过农杆菌侵染将上述基因导入拟南芥的染色体上。上图 中d阶段需要应用植物组织培养技术,其培养基中除必须的营养物质和琼 脂外,还需添加、等物质。一段时间后,可获得抗高盐的 拟南芥植株。
(3)实验检测OrERF^因在高盐条件下的表达水平■结果如下图
(3)
实验结果表明,自然条件下拟南芥中 OrERF基因的表达, 盐处理后 小时OrERE因的表达显著增加。
(4) 此系列实验中设计步骤(2)和(3)的目的是
(5) 植物感受外界干旱、高盐、低温等信号,通过一系列信息传递合成转录因
子。转录因子OrERFM下游基因调节过程如下图。
转录因子OrER祚用的场所是。它通过,启动 转录的过程。最后通过基因产物的作用对外界信号在生理生化等方面作出 适合的调节反应。
【答案】(除第二问第三、四两个空、第四问、第五问第二个空,每空 1分,其
余每空2分,共18分)
(1) AUG
一个基因可以控制多个性状,基因和环境共同决定生物的性状(答对
一个给1分)
(2) PCR Ti质粒 激素(1分) 高盐(高浓度的NaCI) (1分)
(3) 较低 12
(4) 验证OrERF
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