【代码M0904】pGBKT7bait 小规模转化酵母菌 AH109.docxVIP

【代码M0904】pGBKT7/bait 小规模转化酵母菌 AH109 2015-10-14实验管家 实验管家 一.?试剂： 1.?培养基： 2.?其它贮备液： 50% PEG 4000 (Sigma?公司,wt.=3,350)，用前抽滤或高压蒸汽灭菌; 100% DMSO (Sigma?公司); 10?×?TE: 0.1 M Tris-HCl(pH7.5)，10mM EDTA，高压蒸汽灭菌; 10?×?LiAc: 1M LiAc?用乙酸调?pH7.5，高压蒸汽灭菌; 10?×?Dropout/ -Trp-Leu?溶液: 3.2 g DOSupplement(-Leu-Trp)?溶于?500ml ddH2O?中; 20?×?Leu: 200 mgL-Leucine (Sigma?公司)溶于?100ml ddH2O?中; 0.2%Adenine: 0.2g Adenine HemisulfateSalt(Sigma?公司)溶于?100ml ddH2O?中; ddH2O:?高压蒸汽灭菌; 二.?实验步骤： 1.?从?YPDA?平板上挑取生长?1-3?周、直径?2-3 mm?的?AH109?单克隆，接入?1 mlYPDA液体培养基中，振荡打散菌落，然后接入?50 ml YPDA?液体培养基中，30°C?恒温，250rpm?振荡培养过夜（16-18hr），至OD6001.5； 2.?