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双色原位杂交程序 小样法CTAB法提取植物DNA 1.将样品幼嫩叶片放在研钵中，加入800μl2%CTAB充分研磨，转入1.5ml离心管中， 2. 65℃水浴1h（每20min反转摇匀一次）；60-65℃水浴30-40分钟都可。3. 加等体积的氯仿－异戊醇（体积比24：1），或加入苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），颠倒混匀；4. 12000rpm离心15min，取上清于新管中；5. 重复4，5步骤；（可略去）6. 向上清中加入2倍体积的无水乙醇（或2/3体积的异丙醇）沉淀DNA，-20℃放置 7.排出絮状DNA or 离心去上清。8. 加75％的乙醇or76%+NH4AC（10mmol/L）清洗DNA，洗3次，去上清；干燥过夜。9. 风干后加入100-300ul的1：100的RNA酶：水的混合液或ddH2O溶解DNA；10. 取2ul 探针标记50ng/μl （切口平移） ①1×DNA polymerase Ⅰbuffer（1×） 5 μl ②dNTP（10μM） 5 μl ③Bio-11-dUTP or Dig-11-dUTP（1mM） 1.2 μl ④DNase Ⅰ (0.005U/μl)