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Tran swell侵袭实验全面总结 第一节概念 这里想明确两个概念，一个是 Tran swell，另一个是肿瘤细胞侵 袭模型。 Tran swell trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思， well有小室的意 思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置，根据 Corni ng公司的Tran swell说明书中的介绍，可以认为这是一种 膜滤器(Membrane filters ),也可认为是一种有通透性的支架 (permeable supports )。更准确地说，Tran swell 应该是一种 实验技术，这项技术的主要材料是 Tran swell小室(Tran swell chamber, Tran swell in sert ),其外形为一个可放置在孔板里的 小杯子，不同厂家对Tran swell会有不同的命名，而不同型号也 可有不同形状，不同大小，根据实验需要，可有不同选择。 但无论是何种外形，其关键部分都是一致的， 那就是杯子底层的 一张有通透性的膜，而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一 样。这层膜带有微孔，孔径大小有 0.1 - 12.0卩m,根据不同需 要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜（ polycarbo nate m embra ne ）。下图是一个 Tr a ns we I I装置的纵切面 （取”心我 TrsniitH 5?狀何口趙■ pcilyc itLftrj: f i甲jnb 将Tran swell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下 室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培 养液以聚碳酸酯膜相隔。 我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯 膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞， 从 而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。 应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培 养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。当然不 同细胞其体积不同，具体选择时要考虑到细胞大小。这里主要谈 几种大家常用的实验： （1）共培养体系： 小于3.0um孔径条件下，细胞不会迁徙通过，因此，若研究不涉 及细胞运动能力，不需要细胞穿过聚碳酸酯膜，则应选择 3.0卩 m以下孔径。常用0.4、3.0卩m我们实验室用的是 0.4卩m将 细胞A种于上室，细胞B种于下室，可以研究细胞B分泌或代谢 产生的物质对细胞A的影响。 趋化性实验 可用5.0、8.0、12.0卩m膜，上室细胞可穿过聚碳酸酯膜进入下 室，计数进入下室的细胞量可反映下室成分对上室细胞的趋化能 力。 细胞B对细胞A的趋化作用：将细胞A种于上室，细胞B种于 下室，可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞 A的趋化作 用。 趋化因子对细胞的趋化作用： 将细胞种于上室，下室加入某种 趋化因子，可研究该趋化因子对细胞的趋化作用。 肿瘤细胞迁移实验 常用8.0、12.0卩m膜，上室种肿瘤细胞，下室加入 FBS或某些 特定的趋化因子，肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑， 计数进入 下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。 肿瘤细胞侵袭实验常用 8.0、12.0卩m膜，原理与肿瘤细胞 迁移实验类似。 tran swell侵袭实验，其实原理简单地说就是用一层膜将高营养 的培养液和低营养的培养液隔开，细胞放在低营养的培养液里， 为了找吃的，细胞会往高营养的培养液里面跑，但是有膜挡着， 所以要穿过膜才行。我们在膜上涂上一层基质胶， 模仿细胞外基 质，于是细胞要把基质消化了才可以从低营养的培养液跑到高营 养的培养液里面，最后我们检测高营养的培养液里细胞量就可以 知道细胞的侵袭能力了，大概原理就是这样的 肿瘤细胞侵袭模型 用于研究肿瘤细胞侵袭能力的肿瘤细胞侵袭模型有如下几种 （引 自司徒镇强《细胞培养》）： 2. 1体内癌细胞侵袭模型 2. 1. 1皮下移植侵袭模型 2. 1 . 2肌肉内移植侵袭模型 2. 1 . 3腹腔内移植侵袭模型 2. 1 . 4小鼠肾包膜下移植侵袭模型 2. 1 . 5鼠睾丸包膜下移植侵袭模型 2．1．6 小鼠耳廓皮下移植侵袭模型 2． 1．7 鼠爪垫皮下移植侵袭模型 2．1．8 视网内界膜侵袭模型 2．2 体外癌细胞侵袭模型 2． 2．1 体外静止器官培养法 2．2．1． 1 半固体培养基单细胞器官培养法 2．2．1． 2 液体培养基单细胞器官培养法 2． 2．2 半体外半体内器官培养法 2． 2．3 单层细胞器官培养法 2．2．4 瘤细胞球体器官培养法 2．2．4． 1 静止球体器官培养法 2．2．4． 2 旋转摇动球体器官培养法 2． 2．5 单层细胞侵袭实验模型 2． 2．6 Transwell 侵袭小室测定法 可见， Transwell 与侵袭实验之间并不能划等号， Transw