2017人教版高中生物选修三11dna重组技术的基本工具配套课件.ppt

专题 1 基因工程 1 . 1 DNA 重组技术的基本工具 课 前 预习导学 目标 导航 学习目标 1 . 记住 DNA 重组技术所需三种基本工具 的作用。 2 . 理解 DNA 连接酶的种类及作用。 3 . 识记基因工程中 , 作为载体需要具备的条 件。 重点难点 重点 : 基因重组技术所需的三种基本 工具。 难点 : 基因工程载体需要具备的条 件。 预习 导引 一、基因工程 基因工程 , 又称基因拼接技术或 DNA 重组 技术。通俗地说 , 就是按 照人们的意愿 , 把一种生物的 某种基因 提取出来 , 加以修饰改造 , 然后放 到 另一种 生物的细胞里 , 定向地改造生物的 遗传性状 。 二、基因工程的基本工具 1 . 限制性核酸内切酶 ( 限制酶 ) ——“ 分子手术刀 ” (1) 来源 : 主要是从 原核 生物中分离纯化出来的。 (2) 功能 : 能够识别双链 DNA 分子的某种 特定 核苷酸序列 , 并且使每 一条链中 特定 部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 断开。 (3) 结果 : 经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式 : 黏性 末端和 平 末端。 2 .DNA 连接酶 ——“ 分子缝合针 ” (1) 作用 : 将切下的双链 DNA 片段 “ 缝合 ” , 恢复被限制酶切开的 磷酸 二酯键 , 拼接成新的 DNA 分子。 ?? · ???????? DNA 连接酶 : 从大肠杆菌中分离得 到 , 只连接互补的黏性末端 (2) 种类 T 4 DNA 连接酶 : 从 T 4 噬菌体中分离出来 , 对 于两种末端都能连接 , 但对平末端连接效 率比较低 3 . 载体 ——“ 分子运输车 ” (1) 最常用的载体是 质粒 , 它是一种裸露的、结构简单的、独立于细 菌 拟核 DNA 之外 , 并具有自我复制能力的很小的双链环状 DNA 分子。 (2) 其他载体 : λ 噬菌体的衍生物 、动植物病毒等。 (3) 载体的条件 : ①能够在细胞中 自我复制 ; ②有一个至多个 限制酶 切割位点 , 便于外源 DNA 片段 ( 基因 ) 的插入 ; ③具有 标记基因 , 供重组 DNA 的鉴定和选择 ; ④在宿主细胞内友好借居 , 不影响宿主细胞的生命 活动 ; ⑤分子大小应合适 , 以便提取和体外操作。 预习 交流 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的 , 迄今已从近 300 种不 同的微生物中分离出了约 4 000 种限制酶。 1 . 你能推测限制酶在原核生物中的作用是什么吗 ? 提示 : 原核生物容易受到自然界外源 DNA 的入侵 , 但是 , 生物在长期 的进化过程中形成了一套完善的防御机制 , 以防止外来病原体的侵害。 限制酶就是细菌的一种防御性工具 , 当外源 DNA 侵入时 , 限制酶会将外 源 DNA 切割掉 , 以保证自身的安全。所以 , 限制酶在原核生物中主要起 到切割外源 DNA 使之失效 , 从而达到保护自身的目的。 2 . 为什么限制酶不剪切细菌本身的 DNA? 提示 : 生物在长期演化过程中 , 含有某种限制酶的细菌 , 其 DNA 分子 中或者不具备这种限制酶的识别切割序列 , 或者通过甲基化酶将甲基 转移到所识别序列的碱基上 , 使限制酶不能将其切开。 这样 , 尽管细菌中 含有某种限制酶也不会使自身的 DNA 被切断 , 并且可以防止外源 DNA 的入侵。 3 . 你能用图示表示出 Eco R Ⅰ限制酶是如何切割 DNA 片段的吗 ? 提示 : 如下图 : 问题 导学 一、理解基因工程的概念 活动与探究 1 . 基因工程另外的名称是什么 ? 它应用的技术有哪些 ? 提示 : 基因拼接技术或 DNA 重组技术。 DNA 体外重组和转基因等 技术。 2 . 基因工程操作的对象是什么 ? 操作所在的水平是什么水平 ? 操作 的环境是体内 , 还是体外 ? 提示 : 基因工程操作的对象是基因 , 因此其所在的水平是分子水平 ; 基因工程是在生物体外进行 DNA 重组和转基因等技术操作的。 3 . 基因工程的目的或结果是什么 ? 基因工程是定向的吗 ? 提示 : 得到人类所需要的基因产物。基因工程是按照人的意愿进行 设计和施工的 , 所以它会定向改变生物的性状。 迁移与应用 以下有关基因工程的叙述 , 正确的是 ( ) 。 A. 基因工程是细胞水平上的生物工程 B. 基因工程的产物对人类都是有益的 C. 基因工程产生的变异属于人工诱变