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双酚A对雄激素调节社会行为的影响 摘 要 双酚 A(Bisphenol A, BPA)是一种典型的环境内分泌干扰物(Endocrine disruptingchemicals,EDCs)，因其能增加塑料制品的可塑性、透明性和柔韧性， 被广泛应用生产日常化工产品和食品包装材料等制品。其广泛使用除了对水体、 空气、土壤等环境造成严重污染，还使人类和野生动物身暴露其中。BPA 会影 响脑的发育和成年脑的突触可塑性，还会影响行为的发育及其性别分化。 社会行为是指发生在同一物种不同个体间的社会交往和社会关系，包括通讯、 等级、攻击、求偶、交配、哺育等，对动物的生存和繁衍至关重要。本实验室前 期研究发现青春期BPA 暴露降低成年雄鼠与异性的社会性行为、社会探究和攻 击能力，增加亲和性。有报道BPA 可抑制二氢睾酮与雄激素受体(AR)的结合， AR BPA 拮抗 介导的转录活性，那么青春期 暴露对雄性社会行为的影响是否与 其干扰雄激素的活动有关？性激素可以调节神经肽加压素(AVP)和催产素(OT) - DA 对社会行为的调控，还参与调节中脑边缘 奖赏系统而影响社会动机，那么， BPA 是否通过干扰雄激素调节脑内神经肽或DA 活动而影响社会行为？ 本实验以睾丸摘除外源性补充睾酮的雄鼠模型，通过检测青春期BPA 暴露 后社会行为变化，分析杏仁核脑区AVP 及受体和OT 受体水平、DA 系统相关蛋 白的表达水平，探究BPA 对雄激素影响社会行为的机制。 研究方法 3 ICR 1 清洁级 周龄 雄鼠适应 周后，睾丸摘除术建立去势模型。分为三大 组：假手术(sham)、睾丸摘除(GDX)和丙酸睾酮(TP)补充(GDX+TP)。每大组给予 BPA(0.4, 4 mg/kg/day)暴露和溶媒对照，共九组。术后 1周开始每日皮下注射 TP(0.5mg/kg/day) BPA BPA 18d TP 补充和 染毒， 连续染毒 ， 补充至实验结束。 8 12 第 周检测青春期玩耍行为，第 周检测成年期社会行为，采用饲料埋藏实验 检测非社会气味嗅觉功能，三室模型检测社会能力和新奇偏好，社会互作模型检 测社会交互和社会性行为，居住入侵模型检测攻击行为。同时用ELISA 检测血 清和杏仁核脑区睾酮(T)和雌二醇(17β-E )水平；蛋白质免疫印迹法(WB)检测杏仁 2 核脑区雄激素受体(AR)、雌激素β受体(ERβ)、神经肽AVP 受体 1a 型(V1aR)和 I OT 受体(OTR)、纹状体脑区DA 转运体(DAT)和DA I 型受体(DR1)和II 型受体 (DR2)蛋白的表达水平；免疫荧光检测杏仁核脑区AVP 的水平。 研究结果 1 性激素及其受体水平 与sham 组相比，GDX 显著降低小鼠杏仁核脑区的T 和17β-E 以及血清T 水平(p 0.001;p 0.05;p 0.001)，TP 补充后均得到恢复。而 2 GDX TP 17β-E BPA 和 补充不影响血清 2 水平，提示模型建立成功。 暴露显著降 低Sham 和GDX 小鼠杏仁核脑区T 水平(p 0.001,p 0.001;p 0.05)；降低sham、 GDX、GDX+TP 小鼠的血清T 水平(均p0.001)；显著增加杏仁核脑区和血清 17β-E (p 0.05;p 0.001,p 0.001;p 0.001,p 0.01) WB 2 水平 。 分析结果发现，与 sham