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导读:(二)把常规制备得染色体新鲜片子放入5%氢氧化钡溶液中处理30秒,(四)开始抽出羊水2ml只能作测AFP用,不能送培养,因其可能混有母血、(五)穿刺抽吸次数不能大于3次,避免引起流产及胎儿损伤。(六)如羊水混有母血,应加入肝素防凝血,抽吸出得羊水应立即送实验室接种、四、术后注意事项(一)穿刺结束后孕妇卧床休息一小时(二)有宫缩、流血、流水随诊。(三)免重体力劳动二周、(四)适当使用抗菌素及安胎
(四)开始抽出羊水2ml只能作测AFP用,不能送培养,因其可能混有母血。
(五)穿刺抽吸次数不能大于3次,避免引起流产及胎儿损伤。
(六)如羊水混有母血,应加入肝素防凝血,抽吸出得羊水应立即送实验室接种、
四、 术后注意事项
(一)穿刺结束后孕妇卧床休息一小时
(二)有宫缩、流血、流水随诊。
(三)免重体力劳动二周、
(四)适当使用抗菌素及安胎药。
(五)预约二周后复诊。
经皮脐静脉穿刺取血术
一、 适应症:
有以下适应症得孕18周以上得孕妇。
(一)35岁以上得高龄孕妇;
(二)胎儿染色体核型分析;
(三)某些遗传代谢缺陷、基因异常得产前诊断;
(四)诊断胎儿血液疾病:血红蛋白病、血友病、溶血性疾病及自身免疫性异种免疫性血小板减少;
(五)用于胎儿宫内治疗:如输血或药物治疗;
(六)孕期有害物质接触史,如药物、化学物质、射线、病毒感染等。
二、 禁忌症:
(一)先兆流产。
(二)妊娠合并有严重心肺功能不全,重度贫血,凝血机制障碍者、
(三)单纯社会问题要求预测胎儿性别。
三、 注意事项
(一)术前与家人交代可能出现得并发症。
(二)B超确定胎盘及脐带位置、纵、横切较能清楚显示脐蒂处为穿刺点。
(三)如脐蒂显示不清,可穿刺脐带得游离段。
(四)术中抽到血后,要鉴定确为胎儿血。
(五)一般抽血2—8ml,不宜过多,注射器及穿刺针应先抽吸肝素以抗凝。
(六)穿刺次数不能多于2次,穿刺后观察脐带渗血情况。
四、 术后注意事项
(一)拔除穿刺针后压迫穿刺点3—5分钟。
(二)B超继续观察脐带、胎盘穿刺处有无出血及胎心胎动情况。
(三)术后需留院观察4—6小时,B超复查后方离院。
(四)免重体力劳动二周。
(五)预约二周后复查、
(六)术后适当使用抗菌素及安胎药。
血淋巴细胞培养染色体检查
一、 适应症:
(一)习惯性流产、原发不孕及分娩过染色体异常儿得夫妇。
(二)原发闭经、月经稀发、卵巢早衰等月经病患者。
(三)外生殖器畸形、性别不明确得男女。
(四)原因不明得先天性智力低下患者。
(五)各类畸形新生儿或父母染色体异常得新生儿。
二、 培养前准备
(一)所用器皿须经肥皂水、清水、蒸馏水冲洗,过酸清洁烤干消毒备用,消毒时间超过二周要重新消毒。
(二)术前紫外线照射无菌室每周用苍术熏烟1次。
(三)无菌条件下抽取外周血1—2ml,肝素抗凝、
(四)洗手,戴上口包、帽后,换鞋进入无菌室。
三、 培养
(一)用pH为7.2~7.4得1640培养液4ml,加入肝牛血清1ml,PHA0。2ml及血液0。5ml、
(二)37℃培养箱中培养68~72小时,加入秋水仙素终止分裂。
(三)加入秋水仙素后继续培养3~6小时、
(四)每天观察培养箱温度及培养物情况,瞧有无溶血及污染,培养箱温度控制在37±0.5℃为宜。
四、 收获
(一)收集细胞:培养物倒入尖底离心管、以800~1000转/分速度离心5分钟去上清液。
(二)低渗:加入预温为0、075M氯化钾8至10ml,37℃水溶中低渗30分钟。
(三)预固定:以3:1甲醇冰醋酸0、5ml固定30分至1小时2次,必要时4℃冰箱过夜、
(四)冰片滴片,火焰上过数次。
五、 G带得制备
(一)将玻片放于70℃烤箱7~10小时或放于37℃温箱中72小时。
(二)胰酶消化:用Difico胰酶液(浓度为2、5%)0。5ml溶于60ml生理盐水中,再用3%Tris液及0.4%酚红调节pH值7.2~7、4,37℃水溶箱中预温、
(三)染缸内溶液温度达到37℃时放入玻片每次要摸索消化时间,一般为60~80秒。
(四)用pH6。8得磷酸缓冲液配制得20:1吉姆氏染色15~20分钟、
六、 C带得制备
(一)把5%氢氧化钡与2XSSC溶液各50ml分装两染缸中,置于60℃水溶箱中。
(二)把常规制备得染色体新鲜片子放入5%氢氧化钡溶液中处理30秒。
(三)取出清水冲洗干净后再放入2XSSC液中1~1、5小时。
(四)取出清水冲洗干净后以20:1得吉姆氏染色5分钟、
七、 镜检
(一)每例镜下计数30个分裂相,画图分析3个分裂相,嵌合体则计数50个分裂相,各系细胞分析3个分裂相、
(二)画图分析有异常或可疑得,摄片3至5个分裂相,剪贴分析。
(三)培养基pH值严格控制在7。2~7、4之间,以利细胞生长。
(四)所用固定液必须新鲜配
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