实验一 还原糖和总糖含量的测定.pptxVIP

实验一 还原糖和总糖含量的测定 （3,5-二硝基水杨酸比色法） 一．目的 掌握还原糖定量测定的基本原理； 学习比色定糖法的基本操作； 熟悉分光光度计的使用方法。 二．原理 在碱性的条件下，还原糖与 3,5-二硝基水杨酸共热，3,5-二硝基水杨酸被还原为 3-氨基-5- 硝基水杨酸（棕红色物质）,还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度成一定的比例关系， 在 540nm 波长下测定棕红色物质的消光值，查对标准曲线并计算，便可分别样品中还原糖 和总糖的含量。 三．仪器.试剂和材料 仪器： （1）25ml 刻度试管 （2）玻璃漏斗 （3）三角瓶 （4）100ml 容量瓶 3 个 （5）刻 度吸管（1ml,2ml,3ml） （6）恒温水浴 （7）沸水浴 （8）电子天平 （9）分光光度计 试剂； （1）1mg/ml 葡萄糖标准液 （2）3,5-二硝基水杨酸试剂 （3）碘碘化钾溶液 （4）酚 酞指示剂 （5）6ml/L HCI （6）6ml/L NaOH 材料：食用面粉 四．操作步骤 1.制作葡萄糖标准曲线：取 7 支 25ml 刻度试管，编号，按如下操作。;;