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色谱法色谱法是一种分离方法,它利用物质在两相中分配系数的微小差异进行分离。当两相做相对移动时,使被测物质各组分在两相之间反复多次分配,这样原来分配系数只有微小差异的组分彼此分离,以达到分离分析及测定一些物理化学常数的目的。
固定相在色谱法中将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相称为固定相固体或液体
流动相在色谱过程中携带待测组分自上而下流动的一相气体或液体
程序升温色谱柱的温度接设置的程序连续的随时间线性或非线性逐渐升高以便低沸点组分和高沸点组分在色谱柱中都有适宜的保留,色谱峰分布均匀且峰形对称
色谱流出曲线的定义又称色谱图,是指样品产生的电信号随时间变化的曲线。
色谱峰:是色谱流出曲线上突起的部分,近似于对称性正态分布曲线。
峰高:峰的顶点到峰底之间的垂直距离。峰面积:峰与峰底之间的面积。
峰宽:峰两侧拐点处所作两条切线,与基线的两个交点间的距离。
分配系数K在一定温度下和压力下,组分在两相间分配达到平衡,在固定相和流动相中的浓度比,称为分配系数。
灵敏度当一定浓度或一定质量的组分进入检测器,产生一定的响应信号R。以进样量C对响应信号(R)作图,得到一条通过原点的直线。直线的斜率就是检测器的灵敏度(S)
检出限 检测器恰能产生二倍于噪声的信号时,单位时间进入检测器的物质量或单位体积载气中进入检测器的物质量
梯度洗脱采用两种(或多种)不同极性的溶剂,在分离过程中,按一定程序连续变化流动相组成比和极性的一种洗脱模式。生色团(发色团):能吸收紫外-可见光的基团非发色团:在200~800nm波长范围内无吸收的基团。助色团:本身无紫外-可见吸收,但可以使生色团吸收峰加强,同时使吸收峰长移的基团
红移和蓝移:由于化合物结构变化或采用不同溶剂后吸收峰位置向长波方向的移动,叫红移吸收峰位置向短波方向移动,叫蓝移
朗伯-比尔定律吸收光谱法基本定律,描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系。A = kbc
色谱的定性分析(依据方法)利用纯物质对照定性 利用文献保留值定性 加入已知物增加峰高法 保留指数定性法 与其它仪器联用进行定性
化学键合固定相将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶(担体)表面的游离羟基上。原子吸收光谱分析法是基于物质所产生的原子蒸汽对特定谱线的吸收作用来进行定量分析的一种方法。
共振吸收线: 当原子受到外界能量激发时,其能态发生跃迁,使电子从基态跃迁到第一激发态所产生的吸收谱线。
谱线轮廓(吸收线轮廓):吸收强度随ν或吸收系数随ν变化的曲线。
谱线宽度(吸收线半宽度):吸收系数等于极大值一半(1/2K0)处谱线轮廓上两点间的距离(即频率差)称吸收线谱线宽度。谱线变宽因素1. 自然变宽:无外界因素影响时谱线具有的宽度。2热变宽 它与相对于观察者的原子的无规则热运动有关3压力变宽吸收原子与外界气体分子之间的相互作用引起的变宽,又称为碰撞变宽。它是由于碰撞使激发态寿命变短所致。外加压力越大,浓度越大,变宽越显著
4场致变宽主要指电场与磁场的影响使谱线变宽
定量方法优缺点适用范围 外标法 优 计算简单常用的定量方法,无需各组分都被检出洗脱
需要标样 标样和样品测定条件一致 进样体积要准确 缺实验条件要求高 检测器的灵敏度流动相流速组成都不能变化 每次进样体积要有好的重复性 范围 适合2T的控制分析适合于大批量试样的快速分析组分不需全部出峰 内标法优ms/mi比值恒定进样量不必准确
通过测量Ai/As比值进行计算操作条件稍有变化对结果无影响比较准确 适用于低含量组分的分析 不受归一化法使用上的局限 缺 每次分析都要准确称量出内标物和样品的质量 不适于大批量试样的快速分析 在样品中加一个内标物对分离度要求更高范围 试样中所有组分不能全部出峰或只要求测定试样某个或某几个组分时使用此法 归一化法 优 简单准确 操作条件变化时对结果影响不大常用于常量分析尤其适合进样量很少体积不易准确测量的液体样品 缺 样品所有组分必须全部流出且出峰,测量低含量尤其是微量杂质时误差较大 范围 常量分析进样量很少且体积不易准确测量的液体样品,所有组分全部能流出且出峰含量也较多的杂质的测量
气相色谱仪的结构 载气系统 进样系统 分离系统 控制系统 检测系统 分析系统
氢焰离子化检测器对有机化合物具有很高的灵敏度 无机气体、水、四氯化碳等含氢少或不含氢的物质灵敏度低或不响应电子捕获检测器仅对含有卤素、磷、硫、氧等元素的化合物有很高的灵敏度火焰光度检测器又称硫、磷检测器,它是一种对含磷、硫有机化合物具有高选择性和高灵敏度的质量型检测器。热导检测器测定有机溶剂中的微量水通用性检测器只要有导热能力的组分
程序升温 改善分离效果 改善峰形 提高检测灵敏度 缩短分析周期.
荧光猝灭: 受激发原子与其他原子碰撞,能量以热或其他非荧光发射方式给
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