生物组织中物质的分离与检测.ppt

DNA 的粗提取 1 制备鸡血细胞液 静置降沉的 鸡血细胞液 加入蒸馏水 快速搅拌 除去上清液 得到血细胞 2 破裂细胞 过滤去除杂质 取滤液 在滤液中加入 2mol/L NaCl 溶液 使 DNA 溶解 使 NaCl 浓度降低 至 0.14mol/L ， 使 DNA 析出。 加入蒸馏水 3 去除滤液中的杂质 过滤 , 取纱布上 含 DNA 的粘稠物 用 2mol/L NaCl 溶液 轻轻搅拌，溶解 DNA 将粘稠物夹至 2mol/LNaCl 溶液中 过滤，取滤液 生物组织中物质的分离与检测 实验专题复习 生物组织中物质的鉴定 待测物 实验 材料 试剂 条件 现象 还原糖 脂肪 蛋白质 DNA DNA 与 RNA 苹果 、梨、 白萝卜 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀 花生子叶 苏丹Ⅲ(Ⅳ) 染液 显微镜 橘黄（红）色 大豆、蛋清 双缩脲试剂 紫色 鸡血、菜花、 香蕉 …… 二苯胺试剂 水浴加热 蓝色 口腔上皮细胞、 洋葱表皮细胞 甲基绿 吡罗红 显微镜 细胞核呈绿色 细胞质呈红色 细胞无色 颜色反应 ? (08 山东 ) 从细胞膜上提取了某种成分，用非 酶法处理后，加入双缩脲试剂处理后出现 紫色，若加入斐林或班氏试剂并加热，出 现砖红色，该成分是： ? A ．糖脂 B ．磷脂 ? C ．糖蛋白 D ．脂蛋白 ? (08 广东 ) 双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由 于蛋白质有 ? A ．肽键 B ．氨基酸 ? C ．羧基 D ．氨基 斐林试剂 双缩脲试剂 成分 使用 顺序 条件 检测物 现象 斐林试剂与双缩脲试剂的比较 甲液： 0.1g/mL 的 NaOH 溶液 乙液： 0.05 g/mL 的 CuSO 4 溶液 等量混匀，现配现用 A 液： 0.1g/mL 的 NaOH 溶液 B 液： 0.01 g/mL 的 CuSO 4 溶液 先添加 A 液 1mL 混匀， 后添加 B 液 4 滴混匀。 50~65 ℃ 水浴加热 还原糖 蛋白质或多肽 砖红色沉淀 紫色 Cu 2 O 沉淀 斐林试剂 蛋 白 质 检 测 实 验 的 实 验 结 果 双缩脲试剂 A 液与 B 液的添加顺序 对实验结果有影响吗？ ? 实验步骤： ? 1 号试管： 2mL 蛋清稀释液 +A 液 1mL+B 液 4 滴 ? 2 号试管： 2mL 蛋清稀释液 +B 液 4 滴 +A 液 1mL ? 实验预期： ? 若 1 、 2 号试管均呈紫色，则说明双缩脲试 剂 A 液与 B 液的添加顺序对实验结果无影响。 ? 若仅 1 号试管呈紫色，则说明双缩脲试剂 A 液与 B 液的添加顺序对实验结果有影响。 生物体中物质的分离 ? 光合色素的提取与分离 —— 《必修一》 ? DNA 的粗提取与鉴定 —— 《选修一》 光合色素 光合色素的 提取 与分离 ? 实验原理： ? 叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙 醇中，所以 可用无水乙醇提取叶绿体中色 素 。 1 2 3 4 5 （ 1 ）对叶片的要求？为何要去掉叶柄和粗的叶脉？ 叶片柔软、浓绿。叶柄与粗的叶脉含色素少且难以研磨。 （ 2 ）二氧化硅的作用？不加二氧化硅对实验有何影响？ 有助于研磨充分。研磨不充分，色素提取量少。 （ 3 ）丙酮的作用？它可用什么来替代？用水能替代吗？ 溶解色素。可用无水乙醇等有机溶剂，不能用水替代。 （ 4 ）碳酸钙的作用？不加碳酸钙对实验有何影响？ 保护色素。提取液中色素含量少。 （ 5 ）研磨为何要迅速？要充分？过滤时为何用布不用滤 纸？ 防止有机溶剂挥发。充分研磨使色素充分释放。色素易透 过单层尼龙布。 光合色素的提取与 分离 ? 实验原理： ? 色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的 色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快， 溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上 的扩散得慢，因而可用 层析液将不同的色 素分离 。 纸层析法可分离光合色素，以下分离装置示意图 中正确的是 A B C D （ 6 ）滤纸条为何要剪去两角？ 防止两边层析液扩散过快，使层析液同时到达滤液 细线。 （ 7 ）为何不能用钢笔或圆珠笔画线？ 笔中的颜料会随层析液在滤纸条上扩散，影响实验 现象。 （ 8 ） 滤液细线为何要直？为何要重画几次？ 避免色素重叠。 增加色素含量。 （ 9 ） 滤液细线为何不能触到层析液？ 避免色素溶解于烧杯中的层析液。 （ 10 ）滤纸条上色素为何会分离？ 不同色素在层析液中溶解度不同，因而扩散速度不 同。 层析液 胡萝卜素 叶黄素 叶绿素 a 叶绿素 b （ 11 ）色素带最宽的是什么色素？它在层析 液中的溶解度比什么色素大一些？ 叶绿素 a 叶绿素 b （ 2012 上海）如图表