第16章色谱分离原理.ppt

色谱分离原理： (1) 溶质不是在流动相就是在固定相； (2) 溶质只有在流动相才迁移。 L L x 溶质分子在流动相中平均消耗 的时间分数应等于溶质分子在 流动相中分布的分子分数。 柱层析 L u x t R t M R f ? ? ? L u t R t M t M ∝ n m t R ∝ n s t R ∝ n s + n m 因此，滞留因子 R f 也可以用质量分数 ω 表示： t M n m 1 1 R f ? ? ? ? ? ? n s 1 ? k t R n s ? n m 1 ? n m 由以上各式，可得： t R = t M (1+ k ) n s t R ? t M t k ? ? ? t M t M n m k 溶质保留方程 R t 5. 区域宽度 用来衡量色谱峰宽度的参 数，有 三种表示方法 ： （ 1 ） 标准偏差 ( ? ) ：即 0.607 倍 峰高处色谱峰宽度的一半。 （ 2 ） 半峰宽 ( Y 1/2 ) ：色谱峰高一 半处的宽度 Y 1/2 =2.354 ? （ 3 ） 峰底宽 ( W b ) ： W b =4 ? 习 题 假如一个溶质的分配比为 0.2 ，则它在色谱柱的流动 相中的百分率是多少？ ∵ k = n s /n m =0.2 ∴ n m = 5n s n m /n × 100% = n m /(n m +n s ) × 100% = 83.3% 在某色谱条件下，组分 A 的保留时间为 18min ，组分 B 的 保留时间为 25.0min ，其死时间为 2min ，试计算： （ 1 ）组分 B 对 A 的相对保留值； （ 2 ）组分 A,B 的分配比； （ 3 ）组分 B 通过色谱柱在流动相、固定相中保留的时间 是多少？各占保留时间分数为多少？ 解：（ 1 ）组分 B 对 A 的相对保留值 γ B/A =t B /t A =(25 -2)/(18-2) ＝ 1.44 （ 2 ）组分 A,B 的分配比 k A =(18-2)/2=8.0 k B =(25-2)/2=11.5 （ 3 ）组分 B 通过色谱柱在流动相保留的时间是 t M =2min ； 在固定相保留的时间 t B =25 -2=23min 。各占保留时间分数 的 8 ％和 92 ％。 18-3 色谱法基本理论 色谱理论需要解决的问题：色谱分离过程的热力学和动 力学问题。影响分离及柱效的因素与提高柱效的途径，柱效 与分离度的评价指标及其关系。 组分保留时间为何不同？色谱峰为何变宽？ 组分保留时间 ：色谱过程的热力学因素控制； （组分和固定液的结构和性质） 色谱峰变宽 ：色谱过程的动力学因素控制； （两相中的运动阻力，扩散） 两种色谱理论：塔板理论和速率理论； 一、塔板理论 - 柱分离效能指标 1. 塔板理论（ plate theory ） 半经验理论； 将色谱分离过程比拟作蒸馏过程，将连续 的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复 （类似于蒸馏塔塔板上的平衡过程）； 塔板理论的假设： (1) 在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅 速达到； (2) 将载气看作成脉动（间歇）过程； (3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 每次分配的分配系数相同。 色谱柱长： L ， 虚拟的塔板间距离： H ， 色谱柱的理论塔板数： n ， 则三者的关系为： n = L / H 理论塔板数与色谱参数之间的关系为： t R 2 t R 2 n ? 5 . 54 ( ) ? 16 ( ) Y 1 / 2 W b 重要公式 保留时间包含死时间，在死时间内不参与分配 ! 2. 有效塔板数和有效塔板高度 ? ? 单位柱长的塔板数越多，表明 柱效 越高。 用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。 ? 组分在 t M 时间内不参与柱内分配。需引入有效 塔板数和有效塔板高度： t R 2 t R 2 n ? 5 . 54 ( ) ? 16 ( ) Y 1 / 2 W b n eff t 2 t 2 ? 5 . 54 ( ) ? 16 ( ) Y 1 / 2 W b H eff L ? n eff 重要公式 R R 3. 塔板理论的特点、成功和不足 ? 特点： (1) 当色谱柱长度一定时，塔板数 n 越大 ( 塔板高度 H 越 小 ) ，被测组分在柱内被分配的次数越多， 柱效能则越高，所 得色谱峰越窄 。 (2) 不同物质在同一色谱柱上的分配系数不同， 用有效塔 板数和有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定 物质 。 (3) 柱效不能表示被分离组分的实际分离效果 ，当两组分 的分配系数 K 相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分 离。 ? 成功点： ? 流出曲线的形状 ? 浓度极大点的位置 ? 计算和评价柱效能的指标（