2020第二章基因工程工具酶简化版.pptVIP

第五节 DNA 连接酶（ ligase ） 第二章 基因工程的工具酶 一、限制性核酸内切酶的发现 第一节 限制性核酸内切酶 ? 限制 (restriction) ? 修饰 (modification) ? 限制性核酸内切酶的生物学功能：自我保护功能 ( 只 切外来的 DNA ，自身 DNA 被甲基化后切不动 ) ? 核酸酶：水解断裂多核苷酸链的两个相邻核苷酸的 3,5 磷酸二酯键 核糖核酸酶（ RNase ）： 脱氧核糖核酸酶（ DNase ）： 核酸外切酶（ exonuclease ）： 核酸内切酶（ endonuclease ）： ? 限制性核酸内切酶： 二、限制性核酸内切酶的分类 主要特性 I 型 II 型 III 型 限制修饰 多功能 单功能 双功能 蛋白结构 异源三聚体 同源二聚体 异源二聚体 辅助因子 ATP,Mg 2+ ,SAM Mg 2+ ATP, Mg 2+ ,SAM 识别序列 特异性非对称 性序列 特异性 4-8bp 旋 转对称序列 特异性非对称 性序列 切割位点 距识别序列 1kb 处随机性切割 识别序列内或 附近特异性切 割 距识别序列下 游 24-26bp 用途