病理检验技术、教学服务模块 6.神经组织染色法、教学课件 神经组织染色法 -神经胶质细胞.pptxVIP

病理检验技术神经胶质细胞染色安徽医学高等专科学校方安宁概述1.神经胶质细胞是一种有许多突起的细胞，分布于中枢神 经系统和周围神经细胞2.神经胶质细胞细胞突没有轴突和树突之分，细胞质内没 有尼氏体，无核仁，没有传导神经冲动的功能3.HE染色只能显示细胞核，用特殊的银染色或免疫细胞化 学方法可显示细胞的全貌应用1.神经胶质细胞染色主要用于神经胶质肿瘤的诊断与鉴别2.神经胶质细胞染色有金属浸润法和非金属浸润染色法3.这两类染色，均要求取材新鲜，固定及时，使用器皿要 清洗干净，防止污染Mallory磷钨酸苏木素染色法Cajal星形细胞染色法1.试剂配制（1）组织固定液（甲醛溴化铵溶液）：溴化铵2g 福尔马林15ml 蒸馏水加至100ml（2）Cajal氯化金染色液：1%氯化金10ml 氯化汞0.5g 蒸馏水60ml 先将氯化汞溶于10ml蒸馏水中，并加热促溶，再与氯化金溶液混合，最后加入剩余的50ml蒸馏水。该染色液性能不稳定，应于使用前配制，过滤后使用。Cajal星形细胞染色法2.染色步骤（1）组织固定：新鲜组织须在甲醛溴化铵溶液中固定3～8天，如果此前组织已经过其他溶液固定，须再用该固定液固定24h（2）冷冻切片15～20μm（3）蒸馏水漂洗（50ml蒸馏水中加4～5滴福尔马林）（4）蒸馏水洗（5）组织片浸入20℃的Cajal氯化金液4～6h，避光，保持20℃恒温（6）蒸馏水洗3次，每次1min（7）5%硫代硫酸钠固定5min（8）50%乙醇洗，然后将组织片贴附于洁净的载玻片上（9）脱水、透明、封固Cajal星形细胞染色法3.染色结果星形胶质细胞呈紫黑色背景灰红色Holzer磷钼酸结晶紫法1.试剂配制（1）结晶紫三氯甲烷溶液：结晶紫0.5g 无水乙醇2ml 三氯甲烷8ml 混匀即可（2）磷钼酸乙醇溶液：0.5%磷钼酸水溶液10ml 95%乙醇20ml 使用前混合Holzer磷钼酸结晶紫法1.试剂配制（3）三氯甲烷乙醇溶液：三氯甲烷8ml 无水乙醇2ml 使用前混合（4）苯胺三氯甲烷溶液：苯胺-Aniline 4ml 三氯甲烷6ml 1%醋酸1～2滴Holzer磷钼酸结晶紫法2.染色步骤（1）石蜡切片，脱蜡至水（2）磷钼酸乙醇溶液3～5min（3）直接入三氯甲烷乙醇溶液，至组织片呈灰白色（灰白色同色）为止（4）在组织片上滴加结晶紫甲烷溶液1min（5）直接滴入10%溴化钾（6）用纸吸干切片上的溶液（7）入苯胺三氯甲烷溶液快速分化（8）二甲苯洗2次（9）透明、封固Holzer磷钼酸结晶紫法3.染色结果神经胶质纤维及细胞核为蓝色Holzer磷钼酸结晶紫法4.注意事项（1）滴入10%溴化钾溶液时，以出现金黄色为止（2）分化脱色较快，须用显微镜控制Weil-DavenPort小胶质及少突胶质细胞染色法1.试剂配制氨银染色液：氢氧化铵2ml 10%硝酸银染色液15～18ml 氢氧化铵2ml，缓慢滴入10%硝酸银染色液15～18ml，边加边摇，直至呈现稳定的乳白色为止。 Weil-DavenPort小胶质及少突胶质细胞染色法2.染色步骤（1）石蜡切片，脱蜡至水；冷冻切片，入10%氨银染色液（2）蒸馏水洗3次（3）氨银染色液染色15min（4）10%福尔马林溶液还原，直至切片呈咖啡色为止（5）蒸馏水洗3次（6）5%硫代硫酸钠溶液5min（7）充分水洗，如为冷冻切片用纸将周围的水吸干（8）脱水、透明、封固Weil-DavenPort小胶质及少突胶质细胞染色法3.染色结果小胶质细胞和少突胶质细胞呈黑色背景呈淡黄或无色Anderson染色法1.试剂配制（1）混合媒染液：将亚硫酸钠5g，碘片5g，草酸2.5g溶于95ml蒸馏 水中，再加入冰醋酸5ml，密封贮存。临使用前加入等量5%氯 化铁水溶液，混匀即可。（2）Pal漂白液：1%草酸水溶液25ml 1%亚硫酸钠水溶液25ml 使用前等量混合即可Anderson染色法1.试剂配制（3）维多利亚蓝染色液：维多利亚蓝1.5g 蒸馏水100ml（4）Lugol碘液： 碘片1g 碘化钾2g 蒸馏水加至100mlAnderson染色法2.染色步骤（1）石蜡切片，脱蜡至水（2）蒸馏水洗（3）混合媒染液12～15min（4）水洗5min（5）0.25%高锰酸钾溶液，充分氧化5min（6）Pal漂白液漂白，直至切片呈白色为止（7）蒸馏水洗5min（8）60℃的1.5%维多利亚蓝染色液染色15～20min，须保持60℃恒温（9）Lugol碘液处理1min（10）用纸将切片上的碘液吸干，二甲苯洗2次（11）苯胺油、二甲苯等量混合液分化，直至神经胶质纤维呈现淡蓝色，细胞核呈现蓝色为止（12）透明、封固Anderson染色法3.染色结果星形胶质细胞、神经胶质纤维以及细胞核均呈现蓝色小结1.神经胶质细胞主要用于神经