临床输血检验技术、教学服务模块 课件、标准化理论课件、辐照血液 辐照血液的制备、造血干细胞的造备技术及血液制剂的病毒灭活.pptVIP

血浆的病毒灭活方法 巴斯德消毒法（液态加热法） 加入保护剂（葡萄糖、甘氨酸等低分子量的糖或氨基酸）60℃10小时，超滤去除保护剂。 紫外线（UVA）/光敏物法 加补骨脂类化合物S-59用UVA照射 使核酸不能复制、转录，达到病毒灭活效果，对DNA病毒效果好，对RNA病毒效果较差（最早用于血小板病毒灭活）。 病毒灭活新鲜冰冻血浆 （fresh frozen plasma methylene blue treated and removed ） 采集后储存于冷藏环境中的全血，按新鲜冰冻血浆要求分离出血浆在速冻前采用亚甲蓝病毒灭活技术进行病毒灭活并速冻呈固态的成分血。 病毒灭活新鲜冰冻血浆的概念 表14病毒灭活新鲜冰冻血浆质量控制项目和要求 质量控制项目 要求 外观 肉眼观察融化后的新鲜冰冻血浆，应呈黄色澄清液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保血袋完好，并保留注满新鲜冰冻血浆经热合的导管至少10cm。 容量 标示量（mL）±10% 血浆蛋白含量 ≥50g/L Ⅷ因子含量 ≥0.5 IU/mL 亚甲蓝残留量 ≤0.30μmol/L 无菌试验 无细菌生长 表16病毒灭活冰冻血浆质量控制项目和要求 质量控制项目 要求 外观 肉眼观察应呈黄色澄清液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保留注满冰冻血浆经热合的导管至少10cm。 容量 标示量（mL）±10% 血浆蛋白含量 ≥50g/L 亚甲蓝残留量 ≤0.30μmol/L 无菌试验 无细菌生长 血细胞制剂的病毒灭活方法 血液制剂病毒灭活的基本要求 1、病毒的灭活 脂质包膜病毒（HIV、HBV、HCV、HTLV、CMV等）对理化因素（光、热、化学试剂）的抵抗力差，易杀。 非脂质包膜病毒（微小病毒B19等）对理化因素（光、热、化学试剂）的抵抗力强，难杀。 病毒灭活的去除能力 经病毒灭活处理后病毒滴度降低106。 2、保持有效成分的活性 活性或成活力保持在处理前80%以上。 血小板的病毒灭活 紫外线（UVA）/光敏物法 加补骨脂类化合物S-59用UVA照射 使核酸不能复制、转录，达到病毒灭活效果，对DNA病毒效果好，对RNA病毒效果较差。 红细胞的病毒灭活 酞菁光化学法 酞菁 是一种类卟啉合成染料、在远红线区（650-700nm）有较强的光吸收，其复合物如ALPC及其磺化物能够有效灭活红细胞中的VSV和细胞内及游离于细胞外的HIV，且处理的红细胞溶血低、损伤小。 如：噻唑橙 酞菁染料的一种。与红细胞结合后，能够灵敏的插入病毒核酸，阻止其复制。 想一想 1、血液经γ-射线照射后，哪些细胞会失去活性？对红细胞、血小板有影响吗？ 2、什么是造血干细胞？外周血造血干细胞在注射动员剂后几天进行采集？ 3、血液制剂病毒灭活的基本要求是什么？ 4、亚甲蓝加光照法血浆病毒灭活的原理？ 职业教育医学检验技术专业教学资源库 辐照血液的制备、造血干细胞的造备技术及 血液制剂的病毒灭活 学习目标 1、掌握辐照血液的概念、预防TA-GVHD的机制及其保存期限；掌握外周血干细胞采集的方法；掌握血液制剂病毒灭活的基本要求；掌握亚甲蓝/荧光照射法灭活病毒的原理。 2、熟悉脐带血干细胞的概念及优势，熟悉血浆灭活后亚甲蓝残留量的要求。 3、解红细胞制剂、血小板制剂病毒灭活的方法。 辐照血液 使用照射强度为25Gy～30Gy的γ射线对血液制剂进行照射,使血液制剂中的T淋巴细胞失去活性所制成的成分血。冰冻解冻去甘油红细胞和血浆成分不需辐照处理，红细胞成分应在全血采集后14d内完成辐照，经辐照后的血液制剂，其质量控制要求与原血液制剂的要求相同。 辐照原理 利用放射性同位素137Cs衰变中产生的射线穿透有核细胞，直接使细胞核DNA产生不可逆的损伤并干预其正常的修复过程，造成淋巴细胞丧失有丝分裂的活性和停止增殖。经辐照的血液及成分本身不具有放射性，不会对操作者和输血者造成任何放射伤害，是相当安全的。 预防TA-GVHD的机制 免疫缺损或免疫抑制的患者不能清除输入血液中的具有免疫活性的淋巴细胞，使其在体内殖活、增殖，将患者的组织器官识别为非己物质，作为靶标进行免疫攻击、破坏，产生一系列的病理综合征，引起TA-GVHD。 供者的血液经γ射线照射后，淋巴细胞丧失活性，对受血者组织抗原的刺激不引起反应，不会把受血者组织细胞当靶细胞来攻击，就不会引起TA-GVHD。 辐照血液的制备 辐照剂量的设定：血液制剂的辐照剂量以既能灭活淋巴细胞又能维持其他成分血功能与活力且引起