2020显微镜的使用及维护.pptVIP

实验一 普通光学显微镜的使用与维护 ALEX 前 言 显微镜是一种高精密的仪器 , 目前已广泛应 用于生命科学、材料科学、医学等学科领域。 第一代为 光学显微镜， 第二代为电子显微镜， 第三代为扫描隧道显微镜。 3/26/2020 光 学 显 微 镜 电 子 显 微 镜 扫描隧道显微镜 3/26/2020 一、实验目的 1. 掌握显微镜的正确使用 2. 熟悉显微镜的工作原理、基本结构、性能参数 3. 了解显微镜的拆装技术和主要性能参数的设定 3/26/2020 二、显微镜 ? 1. 光学显微镜的成像原理 要 获得清 晰的像， 被观察 标本 AB 应 位于物 镜前焦 点外至 两倍焦 距之间。 标本 AB 经两级放大，在眼的明视范围内看到放大的 A``B`` 像。 3/26/2020 2 、普通光学显微镜的结构 ? 普通显微镜在结构上分： 光学系统，机械系统。 ? 光学系统包括 物镜、目镜、 聚光镜、反光镜 等。 ? 机械系统包括底座、镜臂 粗调手轮、微调手轮、载 物台、 转换器 等。 3/26/2020 显微镜的光学系统 ? 1. 物镜 ? 显微镜光学系 统最核心的部 件 ，其性能直 接关系到显微 镜的性能和成 像质量 。 3/26/2020 显微镜的光学系统 ? 2. 目镜 ? 也称接目镜， 实质上是放大 镜，其作用是 把物镜分辨和 放大的实像再 放大并映入观 察者眼中。 3/26/2020 显微镜的光学系统 ? 3. 光源 ? 4. 聚光镜 光源 ( 灯在底座内 ) 3/26/2020 聚光镜 聚光镜 3/26/2020 孔径光阑 显微镜的机械系统 物镜转换器 物镜转换器 载 物 台 调 节 手 轮 3/26/2020 单目镜镜筒 显微镜的机械系统 调焦螺旋锁 玻片夹 调焦螺旋 3/26/2020 聚光器升降螺旋 3 、普通光学显微镜的正确使用 ? （ 1 ） . 显微镜取镜放置： ? ①移取时右手握住镜臂，左手托住镜座， 保持显微镜平直 ? ②显微镜放置在稳定的台面上，离台边 一定距离（ 6cm 以上） ? ③正确连接接地良好的电源。 3/26/2020 3 、普通光学显微镜的正确使用 将 主 开 关 打 开 ， 调 节 亮 度 将 样 品 置 于 载 物 台 ， 移 入光路 以转换器使 低倍物镜入 光路 转动调焦旋 钮，对样本 聚焦 再次调节亮 度，开始观 察 将观察物镜 转入光路， 再聚焦 调 节 孔 径 光 阑 和 视 场 光 阑 调 节 目 镜 瞳 间 距 和 屈光度 （ 2 ） . 普通光学显微镜的基本观察步骤 3/26/2020 3 、普通光学显微镜的正确使用 ? （ 3 ） . 清洁收镜： ? ①观察完毕，移去标本，扭转转换器，使两 低倍物镜镜头呈 V 字形于载物台上方 ? ②用擦镜纸擦净油镜镜头，绸布擦拭镜身 ? ③是有张力的部件处于松弛状态（聚光镜、 载物台） ? ④调节光亮度旋钮将光亮度调至最暗，关闭 电源。 3/26/2020 4 、显微镜的性能参数 ? （ 1 ） . 数值孔径 又称镜口率，是物体与物镜间 媒质的折射率 n 与物镜孔径角 的一半（β）正弦值的乘积， 用 NA 表示。即： NA ＝ n × sin β 数值孔径与分辨率成正比，与放大率成正比， NA 增大，视场宽度与工作距离都会相应地变小。 3/26/2020 ? （ 2 ） . 放大倍数 ? 又称为放大率，指显微镜经多次成像后最终所观察到的 物像大小相对于原物体大小的比值，常记作 M 。即： M ＝ maq m 是物镜的放大倍数 a 为目镜的放大倍率 q 是在双目显微镜中所增设的棱镜产生的放大倍数 （双目显微镜取值为 1.6 倍，单目显微镜 q 值为 1 ）。 3/26/2020 ? 物镜一般刻有放大倍数× NA （数 值孔径）如： 4 × 0.1 （ 1 组镜片） 10 × 0.25 （ 2 组镜片） 40 × 0.65 （ 3 组镜片） 100 × 1.25 （ 4 组镜片） 160/0.17 （机械镜筒长 / 盖玻 片的厚度） 3/26/2020 ? （ 3 ） . 工作距离 ? 指显微镜正常观察物像时物镜表面到被观察标本间的距 离 ? 显微镜使用过程中习惯所说的“调焦”指的就是调整物 镜的工作距离 ? 它与物镜的数值孔径成反比，一般情况下，物镜的数值 孔径越大，其工作距离越小。 3/26/2020 ? （ 4 ） . 视野 ? 视野又称视场，是指通过显微镜所能看到的标本范围。 视野成圆形 ? 视野大小决定于物镜的倍数及目镜光阑的大小，小的放 大倍数和大光阑可获得较大的视野，反之则视野较小 ? 因为视野的局限，一般均要通过机械装置移动、分区观 察标本。 3/26/2020