生物化学 常用分子生物学技术及应用 常用分子生物学技术及应用.pptxVIP

基因工程与常用的分子生物学技术 ;常用分子生物学技术及应用 ; 核酸原位杂交是用序列已知的、特定标志标记过的核酸作为探针，与细胞或组织切片中的核酸碱基互补配对进行复性杂交，形成专一的杂交分子，通过探针上的标记将待测核酸在细胞、组织中的位置显示出来。 该方法不需从组织或细胞中提取核酸，有很高的灵敏度，并可保持组织与细胞的形态，更能准确地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。 ;探针(probe);二、聚合酶链式反应; 2. PCR有三个反应步骤;;;（二）PCR衍生技术及应用;3.逆转录PCR将RNA链逆转录成为cDNA，再以此为模板通过PCR进行目的基因的扩增。;4.荧光定量PCR是在PCR在扩增时除了加入引物还加入特异性的荧光探针。 ;三、印迹技术;（一）Southern印迹杂交;基本过程;2.探针的制备;② 杂交;;（二）Northern印迹杂交;（三） Western印迹法;;2. 特点 针对性强、特异性强、灵敏度高、适应性强。;1. 基因治疗是指以正常基因矫正、替代缺陷基因，或从基因水平调控细胞中缺陷基因表达的一种治疗疾病的方法。 2. 狭义的基因治疗是指将目的基因导入靶细胞，与宿主细胞的基因整合后表达以达到治疗疾病的方法。 3. 广义的基因治疗是指将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用以达到治疗疾病的方法。 ;5.基因治疗的基本程序;6. 目前存在的问题