复方丹参微丸、黏附微丸溶出和体内药动学研究及质量标准的初步建立0001.docxVIP

复方丹参微丸、 黏附微丸溶出和体内药动学研究及质量标准的初 步建立 复方丹参黏附微丸是课题组基于名优大品种 - 复方丹参制剂结合黏附制剂技 术研制开发的新制剂，剂型设计考虑方中以丹参酮u A为代表的二萜醌类化合物 存在溶出差的缺点，而丹酚酸B和皂苷类成分溶出较好，但体内实际吸收欠佳。通 过多分散黏附技术 ,以期达到改善药物溶出 ,提高药物体内吸收的目的 ,最终提升 药物整体生物利用度。 为评价课题组前期优化确定的黏附微丸处方是否可使丹参中二萜醌类成分 体外溶出有所改善 , 各成分体内吸收和生物利用度是否有所提高 , 可否为工业生 产提供指导 , 本论文对黏附微丸和普通微丸两类制剂进行了体内外评价。本研究 首先建立了两类制剂中三种酚酸类成分及两种二萜醌类成分的含量测定方法 ,接 着以丹参素(Dss)、迷迭香酸(Rosacid)、丹酚酸B(SalB)、隐丹参酮(CryTas)及 丹参酮U A(Tas H A)为指标成分对不同工艺制备的三种微丸(冰片包合复方丹参 黏附微丸(BI-FDAP)、冰片不包合复方丹参黏附微丸(BE-FDAP和普通微丸(FDP)) 进行了体外溶出实验,研究了 BI-FDAP和FDP中迷迭香酸、丹酚酸B、隐丹参酮 及丹参酮H A体内药动学，并初步建立了复方丹参胶囊(黏附微丸)质量标准，为 后续扩大生产提供参考依据。 1三种复方丹参微丸中丹参酚酸类成分及二萜醌类成分的含量测定方法的 建立首先对黏附微丸含量测定的样品处理方法进行了考察 , 分别考察超声法、加 热搅拌法、浸泡溶胀超声法及各影响因素对黏附微丸含量测定结果的影响 , 结果 表明药粉先浸泡溶胀后超声处理其测得回收率最高。 最终确定以浸泡溶胀超声法、 超声法分别作为黏附微丸、普通微丸含量测定的样品处理方法。 建立了三种水溶性丹酚酸类成分（丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B）及两种脂溶 性二萜醌类成分（隐丹参酮和丹参酮U A的HPLC含量测定方法学。实验结果显示 建立的含量测定方法线性、精密度、稳定性、重复性、加样回收均符合要求 , 该 方法可以用于微丸中五种成分的含量测定。 2 三种复方丹参微丸的体外溶出及微丸体内滞留时间考察本部分实验选择 2015年版《中国药典》中的溶出第一法（转篮法）,研究BI-FDAP、BE-FDAP和FDP 三种制剂中Dss、Rosacid、SalB、CryTas及TasH A五种成分的体外溶出情况, 选择pH6.8磷酸盐缓冲溶液作为水溶性成分溶出介质,并加入0.2%十二烷基硫酸 钠（SDS）增加脂溶性成分溶解度。评价并测定三种制剂中五种成分的累积溶出率， 绘制溶出曲线 , 并拟合溶出方程。 水溶性成分考察了在 BI-FDAP和BE-FDAP^ 12h的溶出度,FDP中4h的溶出 度;脂溶性成分在三种制剂中分别考察了 24h 的累积溶出度。 BI-FDAP、 BE-FDAP 和FDP三种制剂中Dss在最后取样时间点累积溶出率分别为:110.38 ± 10.15%、 89.69 ± 5.26%、98.99 ±4.89%;Rosacid 累积溶出率分别为 :97.45 ±4.05%、62.90 ±4.14%、 101.59±3.23%;Sal B 累积溶出率分别为 :101.89±10.54%、 84.08± 1.11%、 96.84± 2.82%;三种制剂中 CryTas 在 24h 的累积溶出率分别为 :40.34 ±3.01%、 42.41±1.37%、 64.05±4.06%;三种制剂中 TasHA 在 24h 内累积溶 出率分别为 :44.08 ±2.83%、 42.03± 0.92%、 45.68±5.22%。 BI-FDAP、BE-FDAP两种制剂中Dss溶出率达到50%分别是在10min,20min。 Rosacid 分别是在 15min,40min;SalB 均在 1h 左右。 而FDP三种水溶性成分达到50%累积溶出率时间均小于5min。即三种水溶性 成分在黏附制剂中表现溶出缓慢，持久,SalB表现最为显著；三种微丸中两种脂 溶性成分溶出趋势相似。 BE-FDAP勺三种水溶性成分最终累积溶出率低于 BI-FDAP和FDP溶出数据 拟合后结果表明,三种制剂中五种成分溶出均符合扩散机理（BE-FDAP中丹参素 扩散与溶蚀并存 ） 。 溶出实验结果表明黏附制剂改变了水溶性成分勺溶出趋势 ,且制剂中辅料勺 比例对水溶性成分勺溶出产生影响。 为评价复方丹参黏附微丸在体内勺黏附特性 进行小动物活体成像实验来表现黏附微丸和普通微丸在体内勺动态代谢过程。 大鼠灌胃带有 Dir 荧光染料勺黏附微丸与普通微丸 , 灌胃后在不同时间对各 组大鼠麻醉,置于暗箱中拍照 ,根据荧光位置说明微丸在体内勺代谢过程。 共记录 12h 荧光微丸在大鼠体内勺滞留