原创力文档- 1、本文档共10页，其中可免费阅读4页，需付费100金币后方可阅读剩余内容。
- 2、本文档内容版权归属内容提供方，所产生的收益全部归内容提供方所有。如果您对本文有版权争议，可选择认领，认领后既往收益都归您。
- 3、本文档由用户上传，本站不保证质量和数量令人满意，可能有诸多瑕疵，付费之前，请仔细先通过免费阅读内容等途径辨别内容交易风险。如存在严重挂羊头卖狗肉之情形，可联系本站下载客服投诉处理。
- 4、文档侵权举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
熔解温度是引物的一个重要参数这是当的引物和互补序列表现为双链分子时的温度对于设定退火温度是必需的在理想状态下退火温度足够低以保证引物同目的序列有效退火同时还要足够高以减少非特异性结合合理的退火温度从到退火温度一般设定比引物的低设定有几种公式有的是来源于高盐溶液中的杂交适用于小于碱基的引物有的是根据含量估算确定引物最可信的方法是近邻分析法这种方法从序列一级结构和相邻碱基的特性预测引物的杂交稳定性大部分计算机程序使用近邻分析法根据所使用的公式及引物序列的不同会差异很大因为大部分公式提供一个估算的值所
熔解温度( Tm)是引物的一个重要参数。这是当 ％的引物和互补序列表现为双链 A分 子时的温度.Tm对于设定PCR退火温度是必需的。在理想状态下，退火温度足够低，以保证 引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从 ℃ 到7 ℃。退火温度一般设定比引物的 Tm低 ℃。
设定 Tm有几种公式。有的是来源 于高盐溶液中的杂交，适用于小于 18碱基的引物。有的 是根据 GC含量估算 Tm。确定引物 m最可信的方法是近邻分析法。这种方法从序列一级结构 和相邻碱基的特性预测引物的杂交稳定性。大部分计算 机程序使用近邻分析法。 根据所使用的公式及引物序列的不同，Tm会差异很
文档评论（0）