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实验二 槐米中芦丁的提取和芦丁水解制备槲皮素 、概述 ）的花蕾（槐米） ，芦丁含量高达 12%?20%植物来源：槐米系豆科植物槐树（ ）的花蕾（槐米） ，芦丁含量高达 12%?20% 养麦中含量也较高。含芦丁成分的植物高达 70种以上。 P样作用。在临床上用作毛细 P样作用。在临床上用作毛细 主要化学成分的结构及理化性质： 芦丁（ Rutin 水缩合形成的苷（芸香糖为葡萄糖与鼠李糖组成的双糖 含 ）也称芸香苷，是槲皮素 3位上的羟基与芸香糖脱 ）。分子式：C27H30O16 - 3H2O，淡黄色针状结晶， 三分子结晶水，熔点 174?178C ,无水物为188?190C。易溶于碱液，显橙黄色，酸化后又析出。在冷 水中的溶解度为1 : 10000，热水中为1： 200，在冷乙醇中为 1： 650，在热乙醇中为 1： 60,在吡啶中 为1: 12。微溶于乙酸乙酯和丙酮，难溶于苯、三氯甲烷、石油醚等极性小有机溶剂，可溶于硫酸和盐 酸，加水稀释又可析出。 UV ￡2爲:259 , 299 , 359nm。芦丁用20%HSO4 水溶液水解可得槲皮素 （芦丁 的苷元），呈黄色结晶， 313?314 的苷元），呈黄色结晶， 313?314C, C15H10O7- 2H2O,在热乙醇中溶解度为 醇中 1： 290 , 难溶于水和苯等极性小的有机溶剂，可溶于极性较大的有机溶剂如甲醇、乙酸乙酯、丙酮等 1： 23，冷乙 UV EtOH max 255, 269sh,301sh,370nm。 皂苷（saponin ）粗品为白色粉末， m.p.210 ?220 C。 皂苷（saponin ）粗品为白色粉末， m.p.210 ?220 C。易溶于吡啶。能溶于 其他成分理化性质： 200倍的甲醇，酸水解后获得两种苷元（白桦酯醇、槐花二醇）及糖（糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄糖醛 酸内酯）。白桦酯醇 ）无色针晶， （betulin 醇、 三氯甲烷、苯等；难溶于石油醚。槐花二醇 （ m.p215 ?217 C , Sophoradiol 224 C，溶于 能溶于醋酸、 无色针晶， 丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙 m.p219 ?220 C或 石油醚、苯、丙酮、甲醇，难溶于水。芦丁和槲皮素结构式如下所示 OH O OH OH HO OH 含 芦丁 MW664.6 ( 分子水） OH 2 2 实验部分 （一） 实验目的要求 制备芦丁，供药用。 通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。 掌握黄酮苷水解制备黄酮苷元的方法。 熟悉重结晶技巧。 了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。 （二） 实验的基本原理 芦丁的提取原理 利用芦丁结构中含有多个酚羟基，呈酚酸性，能在碱水中溶解的性质，可用碱性溶剂进行提取，提 取液加酸后可沉淀析出（碱溶酸沉法） 。也可利用芦丁在冷水中溶解度小，在热水中溶解度大的性 质进行提取。 芦丁的分离原理 利用芦丁结构在冷乙醇中溶解度小，在热乙醇中溶解度大，以及在热水中溶解度大，在冷水中溶解 度小，芦丁用溶剂加热溶解后，趁热抽滤，滤液放冷后就能析出而达到分离的目的（如不纯可再 重复操作进行分离） 。也可采用醇-水法进行精制。 芦丁的鉴定原理 （1 ）利用吸附薄层色谱的分离原理，芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开，显色，以达 到鉴定芦丁的目的。 （2 ）通过专属的化学显色反应，确定芦丁的成分类型（黄酮类） 。 （三）实验内容 用酸碱法、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。 在酸性条件下加热回流水解芦丁，制备槲皮素。 溶剂重结晶纯化芦丁和槲皮素。 薄层色谱法和显色反应鉴定芦丁和槲皮素 （四）实验药材仪器与试剂 实验药材 槐米20g。 仪器：500ml烧杯，1000ml烧杯，250ml园底烧瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml锥形瓶、 50ml 锥形瓶、研钵、减压过滤装置，布氏漏斗，层析缸等。 试剂：硼砂、氧化钙、 HCI、H2SQ、三氯化铝、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、滤纸等。 （五）实验方法与注意事项 芦丁的提取 （1） 方法一（碱溶酸沉法）称取槐米粗粉 20g，在研钵中研碎后放入 500ml烧瓶中，加0.4%硼砂水溶 液200ml ，用加热磁力搅拌器 加热微沸后， 加石灰乳 （1.5g氧化钙加入10ml水研成乳液） 调PH8?9, 一边加一边搅拌，加热微沸 30min，补充失去的水分，并保持溶液 PH8?9静置约 5分钟过滤（或趁热 抽滤），药渣（第二次提取）再用 0.4%硼砂水溶液 200ml煮沸半小时（此时不需加石灰乳） ，随时加水补 充失去的水分，合并两次滤液（总体积约 400ml ），放冷（60~70 C）,小心滴加浓盐酸，同时快速搅拌调 制溶液PH4，室温放置或在冰箱中放置 （过夜），沉淀，待全部沉淀物析出后，