临床输血检验技术 标准化理论课件、血浆及冷沉淀凝血因子的制备 血浆及冷沉淀因子的制备、粒细胞的制备.pptVIP

职业教育医学检验技术专业教学资源库 血浆及冷沉淀凝血因子的制备、粒细胞的制备 学习目标 1、掌握血浆制备的方法，新鲜冰冻血浆和冰冻血浆的区别，及其保存期限。 2、掌握单采粒细胞概念、质量控制项目和要求、保存期限。 3、掌握冷沉淀凝血因子的概念、质量控制项目和要求、保存期限。 血浆的制备 血浆 : 抗凝全血经过离心去除细胞有形成分后的淡黄色液体，含水、电解质、激素、蛋白质、凝血因子等。 制备方法 塑料血袋要求 双联袋，三联袋均可。 联袋全血平衡后对称装入离心机中，4400g离心5到6分钟，温度2到6摄氏度，刹车5到6挡，在离心开始前应将离心机开机半小时。 离心机的血液应轻轻拿出，放入分浆或用虹吸方式将血浆分出，又可以使用全自动血细胞分离机将血浆分出。 血浆分类 新鲜冰冻血浆 fresh frozen plasma 采集后储存于冷藏环境中的全血，最好在6小时（保养液为ACD）或8小时（保养液为CPD或CPDA-1）内，但不超过18h将血浆分离出并速冻呈固态的成分血。 注：要求全血采集顺畅，200ml采集不超过7分钟，400ml不超过13分钟 表13 新鲜冰冻血浆质量控制项目和要求 质量控制项目 要求 外观 肉眼观察融化后的新鲜冰冻血浆，应呈黄色澄清液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保血袋完好，并保留注满新鲜冰冻血浆经热合的导管至少10cm。 容量 标示量（mL）±10% 血浆蛋白含量 ≥50g/L Ⅷ因子含量 ≥0.7 IU/mL 无菌试验 无细菌生长 血浆分类 单采新鲜冰冻血浆 apheresis fresh frozen plasma 使用血细胞分离机在全封闭的条件下自动将符合要求的献血者血液中的血浆分离出并在6h内速冻呈固态的单采成分血。 血浆分类 冰冻血浆 frozen plasma frozen plasma cryoprecipitate reduced 采用特定的方法在全血的有效期内，将血浆分离出并冰冻呈固态的成分血，或从新鲜冰冻血浆中分离出冷沉淀凝血因子后将剩余部分冰冻呈固态的成分血。 表15 冰冻血浆质量控制项目和要求 质量控制项目 要求 外观 肉眼观察应呈黄色澄清液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保留注满冰冻血浆经热合的导管至少10cm。 容量 标示量（mL）±10% 血浆蛋白含量 ≥50g/L 无菌试验 无细菌生长 血浆保存 新鲜冰冻血浆-18℃以下保存时间一年 普通冰冻血浆-18℃以下保存时间四年 冷沉淀凝血因子的制备 冷沉淀凝血因子 cryoprecipitated antihemophilic factor 采用特定的方法将保存期内的新鲜冰冻血浆在1℃～6℃融化后，分离出大部分的血浆，并将剩余的冷不溶解物质在1h内速冻呈固态的成分血。 制备方法 ??离心法 ?取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆，置4±2℃冰箱中过夜融化或在4±2℃水浴装置中融化。 当血浆基本融化时，取出血浆，在4±2℃的环境下重离心。 将大部分上层血浆移至空袋，制成冰冻血浆。将留下的20～30ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。 制备方法 将新鲜冰冻血浆袋（A袋）置于4±2℃水浴装置中，另一空袋（B袋）悬于水浴箱外，位置低于血浆袋，两袋之间形成一定的高度落差。 血浆融化后，随时被虹吸至B袋中，当融化至剩下40～50 ml血浆与沉淀物时，闭合导管，阻断虹吸。将血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子（A袋）。将A袋和B袋（冰冻血浆）热合断离。 ?虹吸法 表18 冷沉淀凝血因子质量控制项目和要求 质量控制项目 要求 外观 肉眼观察融化后的冷沉淀凝血因子，应呈黄色澄清液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保留注满血浆经热合的导管至少10cm。 容量 标示量（mL）±10% 纤维蛋白原含量 来源于200mL全血：≥75mg 来源于300mL全血：≥113mg 来源于400mL全血：≥150mg Ⅷ因子含量 来源于200mL全血：≥40IU 来源于300mL全血：≥60IU 来源于400mL全血：≥80IU 无菌试验 无细菌生长 冷沉淀凝血因子的保存 -18℃以下保存时间一年 手工制备粒细胞 根据形态差异可分为颗粒和无颗粒两大类。颗粒白细胞（粒细胞）中含有特殊染色颗粒，用瑞氏染料染色可分辨出三种颗粒白细胞即中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞；无颗粒白细胞包括单核细胞和淋巴细胞。嗜酸性粒细胞具有粗大的嗜酸性颗粒，颗粒内含有过氧化物酶和酸性磷酸酶。 绝大部分的粒细胞是中性粒细胞。（ne