生物学]蛋白质析技术.pptVIP

蛋白质层析技术  导言 生物技术有三大部分:生化分离技术; DNA重组及基因转移技术;免疫检测技术。 其中生化分离技术是生物技术的基础和支 柱。 层析是最有效的分离手段,也是最重要的 蛋白质纯化工具。层析主要是物理方法, 是混合熵减少的过程,必然消耗自由能。 基因工程下游的核心是层析。 层析技术的理论和实践已高度发展和完善。  蛋白质结构组计划 目标:用十年的时间获得一万种蛋白的三 维结构。 但是只有57%被克隆的蛋白能够成功表达。 而且在这些表达的蛋白中,只有28%的重 组蛋白能够被纯化出来。 最终,只有2%-10%的最初的目标蛋白被成 功的建立。  蛋白质层析分离纯化机制 电荷不同:离子交换层析 大小、形状:凝胶过滤层析 疏水区域:疏水层析 特异性:亲和层析(选择性是最优秀 的)  层析介质 生物兼容性:亲水性,大孔径,不会使生 物大分子失活,没有生物化学毒性一过强 吸附、泄露。 化学稳定性:在生物大分子存在的化学条 件下是稳定的 必要的机械性能:流体中的耐压性、弹 性  化学组成:亲水多孔高聚物等 天然高分子多糖:纤维素,交联葡聚糖,琼脂糖 及其共聚物——孔径分布宽,较软 合成高聚物:聚丙烯酰胺类,聚丙烯酸脂类,聚 二醇聚丙烯酸脂共聚物,亲水性处理的聚苯 乙烯类(都是交联大孔高聚物) 无机化合物: