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编码链(coding strand)
模板链(template strans);;第一节 RNA转录的基本过程
第二节 转录机器的主要成分
第三节 启动子与转录的起始
第四节 原核生物与真核生物 mRNA 特征的比较
第五节 终止与抗终止
第六节 内含子的剪切、编辑及化学修释;第一节 RNA 的 转录;随机扩散;全酶-启动子形成闭合二重复合体;
闭合复合体转变为开放复合体;
整合进最初两个核苷酸,形成一个磷酸二酯键,形成三重复合体;;真核生物转录的起始;正常的延伸中,新的磷酸二酯键在特定的活性位点进行;;转录的终止;第二节 转录机器的主要成分;催化中心; 核心酶可以DNA为模板合成RNA,但不能在正确的位点起始。起始必须有σ 因子;σ 因子能够提高酶和启动子识别的特异性,同时也降低酶和非特异位点的亲和力。在某些细菌细胞内含有能识别不同启动子的σ 因子,以适应不同生长发育阶段的要求,调控不同基因转录的起始。;聚合酶前进时,将前端的DNA双链解旋,在后方则重新结合。
聚合酶所保护的DNA序列约为40 bp,而解旋的DNA区域大约17 bp,RNA的3‘端大约有20~30个核苷酸与DNA或聚合酶结合,而其中RNA-DNA杂交区仅约9 bp。; ; 真核生物RNA聚合酶一般由8~16个亚基所组成。其中RNA 聚合酶II的两个大亚基(RPB1和RPB2)与细菌核心酶的两个大(β和β‘);(RPB3和RPB11)与α亚基同源;RPB6与ω亚基同源。
真核生物RNA聚合酶共性:聚合酶中有两个相对分子质量超过1X105的大亚基;三类聚合酶有共显小亚基的倾向。
;RNA聚合酶I的转录产物是45S rRNA,经剪接修饰后生成除5S rRNA外的各种rRNA。
RNA聚合酶II在核内转录生成hnRNA,经剪接加工后生成成熟mRNA被运送到细胞质中作为蛋白质合成的模板。
核不均一RNA(heterogeneous nuclear RNA,hnRNA):核内未被剪接的有内含子的mRNA前体,或是核内mRNA的初级转录产物。;RNA聚合酶III的转录产物是tRNA,5S rRNA,snRNA。
SnRNA(small nuclear RNA),即核内小RNA,主要存在于核内,是核内100~300个核苷酸序列的小型RNA,参与RNA的剪接。;2、转录复合物; 转录因子(transcription factor, TF):真核生物转录起始过程中,除RNA聚合酶之外的其它辅助因子统称为转录因子。;小 结;第三节 ???动子与转录的起始;;转录单元
(transcription unit);启动子区的基本结构;Date;TATA box:位于RNA聚合酶II转录起点上游约-35~
-25 bp处的共同序列TATAAA,绝大多数情况下全部是A-T碱基对,只有少数含有G-C。
CAAT box:在起点上游-78~-70 bp处还有另一段共有序列CCAAT,称为CAAT区。
GC box:在起点上游-110~-80 bp处有一段富含GC碱基对的序列(GCCACACCC或GGGCGGG),称为GC区。
增强子:能强化转录起始频率的DNA序列。;二、启动子区的识别;σ70的氨基酸与启动子-10区非模板链特异碱基的结合;Date;第四节 原核生物与真核生物 mRNA 特征的比较;2、许多原核生物 mRNA 以多顺反子的形式存在;β -半乳糖苷酶;mRNA;3、原核生物mRNA 5′端无帽子结构,3 ′ 端没有或只有较短的poly(A) 结构,在起始密码子AUG上游7~12个核苷酸处有6个核苷酸的保守序列,被称为SD序列。
SD序列在与核糖体的结合过程中起作用。;5′ 5′
Gppp + pppApNpNp...
↓
5′ 5′
GpppApNpNp... + pp + p ;甲基化;帽子结构的作用:
1、提高mRNA的活性及稳定性;
2、作为蛋白质合成起始信号的一部分。;Pol I 和pol III 在特定的位点终止合成;Pol II无特定终止位点,3’-OH末端通过在特定位点切割后加上poly(A)来形成。
几乎所有真核基因的3’转录终止位点上游15~30 bp存在保守序列AAUAAA,该序列作为切割和添加poly(A)位点的信号。;特异组分(Cut and polyA Special factor, CPSF)识别AAUAAA序列;
产生正确的末端结构需要核酸内切酶(由CFI和CFII组成)切割RNA;
激发因子CstF,结合在切割位点下游一富含G-U的序列
poly(A)聚合酶(PAP)合成poly(A)尾部; 。;小 结;第五节
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