第3讲 细胞分化的分子机制.pptVIP

第二章 细胞分化的分子机制— 转录和转录前的调控 毕可然 bikeran@yahoo.cn 细胞分化是单个的全能细胞受精卵逐渐发生各自特有的形态结构、生理功能和生化特征的过程。其结果是在空间上细胞之间出现差异，在时间上同一细胞和它以前的状态有所不同。细胞分化是从化学分化到形态、功能分化的过程。 细胞表型 cell phenotype：是细胞特定基因型在一定的环境条件的表现，是细胞的特定性状。 全能细胞:能产生完整有机体，并且机体所需要的全部基因信息都被表达的细胞 多潜能细胞: 含有的基因信息被限制表达的细胞 分化细胞:多潜能细胞通过分离和分化发育成的特殊细胞表型 细胞分化过程中，各种细胞内合成了不同的专一蛋白质（如水晶体细胞合成晶体蛋白，红细胞合成血红蛋白，肌细胞合成肌动蛋白和肌球蛋白等），而专一蛋白质的合成是通过细胞内一定基因在一定的时期的选择性表达实现的。因此，细胞分化的核心问题是基因调控。 3.分子生物学证据： 核酸分子杂交（Nucleic acihybridization）：有机体不同组织细胞中拥有序列完全相同的核基因组DNA； 原位杂交（in situ hybridization）：许多已分化细胞仍含有不表达的其它组织特异性基因 染色质上特异DNA序列 染色质上调节蛋白 RNA聚合酶 （1）启动子：是RNA聚合酶结合位点及其周围的一组转录调控组件（包括转录起始点以及典型的TATA盒）。 （2）增强子：是增强启动子转录活性的DNA序列，并决定组织特异性表达。 （3）沉默子：能够对基因转录起阻遏作用的DNA片段，属于负性调控元件。 （二）调节蛋白 （1）基本转录因子 是指能够直接或间接与启动子核心序列TATA盒特异结合、并启动转录的一类调节蛋白。（参与构成基础转录装置所需的一类通用转录因子） 真核生物 RNA聚合酶Ⅱ（ RNApol Ⅱ ）识别启动子所需的转录因子（TFⅡ）有多种亚类： TFⅡA，TFⅡB，TFⅡD，TFⅡE，TFⅡF，TFⅡ-I等。 其中TFⅡD最先、最直接与启动子TATA盒结合的转录因子，然后按一定时空顺序依次结合RNApol Ⅱ和其他转录因子，形成一个转录前起始复合物（PIC）。 转录前起始复合体的组装（PIC) 反式作用因子的特殊功能域 DNA结合域；转录激活域；结合其他蛋白质的功能域。 (三) RNA聚合酶 1. 启动子与RNA聚合酶活性 启动子核苷酸序列影响与RNA聚合酶的亲和力。 2. 调节蛋白与RNA聚合酶的活性 调节蛋白通过DNA-蛋白质相互作用、蛋白质-蛋白 质相互作用影响RNA酶活性。 原核生物基因转录调控 阻遏蛋白的负性调节作用 色氨酸操纵子的调节机制 色氨酸操纵子（trp operon）： 阻遏型操纵子； 主要参与调控一系列用于色氨酸合成代谢的酶蛋白的转录合成。 当细胞内缺乏色氨酸时，此操纵子开放； 而当细胞内合成的色氨酸过多时，此操纵子被关闭。 Trp操纵子的trpE基因5′－端“前导序列” 原核生物基因表达调控的特点 主要在转录水平进行调节 1） σ 因子的特异启动作用 2） 操纵子调控机制具有普遍性 3） 结构基因进行多顺反子转录 4） 阻遏蛋白阻遏转录具有普遍性 真核生物基因转录调控 一、真核生物基因组特点 （一）基因组结构庞大 人类的单倍体基因组由 3X109 的核苷酸组成，含有大约2.6 ? 3.9万个基因。 （二）形成染色体结构 真核生物的基因组是以DNA和蛋白质结合形成染色体结构形式而存在于细胞核。 （三）单顺反子 真核基因的转录产物一般是单顺反子 。 单顺反子 一个编码基因转录生成一个mRNA分子，并指导翻译一条多肽链。 （四）重复序列 真核生物基因普遍存在重复序列。 根据重复频率不同，分为以下3类： 高度重复序列 中度重复序列 单拷贝重复序列 反向重复序列（回文序列） 二、真核基因表达调控的特点 （一）DNA、染色体水平的变化特点 2．DNA拓朴结构变化 天然双链DNA几乎均以负性超螺旋构象存在。 当基因激活后，则转录区前方的DNA拓朴结构变为正性超螺旋，有利于RNA聚合酶向前移动，进行转录。 3. DNA甲基化 DNA甲基化程度与基因表达呈反比。 4．染色体结构的变化 组蛋白发生修饰，碱基