《全国临床检验操作规程》.docxVIP

全国临床检验操作规程（第 3版） 精液检查 标本收集 在3个月内检查2次至数次，二次之间间隔应＞7天, 但不超过3周。 采样前至少禁欲 3天，但不超过7天。 采样后1h内送到检验科。 用清洁干燥广口塑料或玻璃小瓶收集精液，不宜采 用避孕套内的精液。某些塑料容器具有杀精子作用， 但是否合适应事先做实验。 应将射精精液全部送检。 传送时温度应在 20~40 C。 容器必须注明患者姓名和（或）识别号（标本号或 条码），标本采集日期和时间。 和所有体液一样，精液也必须按照潜在生物危害物 质处理，因为精液内可能含有肝炎病毒、人类免疫缺 陷（病毒）和疱疹病毒等。 一般性状检查 一般性状检查包括记录精液量、颜色、透明度、粘稠 度和是否液化。 外观 正常精液呈灰白色或乳白色，不透明。 棕色或红色提示出血。黄色可能服用某种药物。精子 浓度低时精液略显透明。 正常精液是一种均匀黏稠的液体， 射精后立即凝 固，30 min后开始液化。若液化时间超过 60 min考 虑为异常，应记录这种情况。正常精液可含有不液化 的胶冻状颗粒。 量用刻度量筒或移液管测定。正常一次全部 射精精液量约2~5 ml。精液量过多或过少是不育的原 因之一。 黏稠度 在精液全部液化后，用Pasteur滴管吸 入精液，然后让精液依靠重力滴落， 并观察拉丝长度。 正常精液呈水样，形成不连续小滴。黏稠度异常时， 形成丝状或线状液滴(长度大于 2 cm)。也可使用玻 璃棒或注射器测定黏稠度。 酸碱度 用精密试带检查。正常人 pH为 7.2~8.0,平均 7.8。 精子存活率 精子存活率(motility )用活精子比例来反映。 伊红染色法 【试剂】 5 g/L伊红Y染色液：伊红 Y 0.5 g ,加生理盐水 至 100 ml。 【操作】 在载玻片上加新鲜精液和伊红溶液各 1 滴，混匀后，加上盖玻片， 30 s后在高 倍镜下观察，活精子不着色。死精子染 成红色。 计数200个精子，计算未着色(活精子) 的百分率。 伊红-苯胺黑染色法 【试剂】 10 g/L伊红Y染色液：伊红1 g,加蒸储水 至 100 ml。 100 g/L苯胺黑染色液：苯胺黑 10 g,加蒸 储水至100 ml。 【操作】 取小试管，加新鲜精液和伊红溶液各 1 滴，混匀。 30 s后，加苯胺黑溶液 3滴，混匀。 30 s后，在载玻片上，加精液-伊红-苯胺 黑混合液1滴，制成涂片，待干。 油镜下观察，活精子为白色，死精子染 成红色，背景呈黑色，计数 200个精子， 计算未着色活精子的百分率。 精子低渗膨胀试验(HOS) 【试剂】 膨胀液：枸椽酸钠 0.735 g,果糖1.351 g,加蒸 储水至100 ml。分装，-20 C冷冻保存，使用前 解冻，并充分混匀。 【操作】 取小试管，加1 ml膨胀液，37 C预温5 min。 加0.1 ml液化精液，轻轻搅匀，在 37 C 孵育至少30 min。 在相差显微镜下观察精子，膨胀精子为 尾部形状发生变化的精子，即活精子。 计数200个精子，计算膨胀精子的百分 率。 【参考区间】 在排精30~60 min内，约有70%以上精子应为活 动精子。精子低渗膨胀试验应有 60%以上精子出 现尾部膨胀。 【附注】 如室温低于 10 C时，应将标本先放入 37 C温育5~10 min后镜检。 某些标本试验前就有尾部卷曲的精子， 在HOS试验前，计算未处理标本中尾部 卷曲精子的百分数， 实际HOS试验结果 百分率就等于测定值减去未处理标本中 尾部卷曲精子百分率。 HOS也是精子尾部膜功能试验。 精子活力 WHO推荐一种无需复杂设备而能进行简单精子 活力(activity )分级的方法。 【操作】 取10 l标本涂片，连续观察至少 5个视野， 对200个精子进行分级，首先计数a级和b级精 子，随后在同一视野内计数 c级和d级精子。 【结果判断】 根据下述标准把精子活力分为 a、b、c、d四级。 a级：快速前向运动：37C时速度＞ 25 m/s, 或20C时速度＞ 20 m/s (25 m大约相当于 精子5个头部的长度，或半个尾部的长度) 。 b级：慢速或者呆滞的前向运动。 c级：非前向运动(v 5 m/s)。 d级：不动。 【参考区间】 正常精液采集后 60 min内，a级+b级精子达50% 以上。 精子计数 【试剂】 精子稀释液：碳酸氢钠 5 g, 40%甲醛溶液1 ml, 蒸储水100 ml,待完全溶解过滤后使用。 【操作】 于小试管内加精子稀释液 0.38 ml,吸液化精 液20 1,加入稀释液内摇匀。 充分摇匀后，滴入改良Neubauer血细胞计数 池内，静置1~2 min,待精子下沉后，以精 子头部作为基准进行计数。 如每个中央方格内精子少于 10个，应计数所 有25个中方格内的精