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目的基因到工程菌的构建 基因工程的诞生 1972 年，美国斯坦福大学的学者首先在体外进行了 DNA 改造的研究，他们把 SV40（一种猴病毒）的 DNA 分别切割，又将两者连接在一起，成功构建了第一个体外重组的人工 DNA 分子。 1973 年，Cohen 等人首次在体外将重组的 DNA 分子导入大肠杆菌中，成功地进行了无性繁殖，从而完成了 DNA 体外重组和扩增的全过程。在这个的基础上，基因工程诞生了。 SV40 病毒 第一个重组体的构建 1.1 基因工程技术的三大理论基础 一是 20 世纪 40 年代 Avery 等人通过肺炎球菌的转化实验证明了生物的遗传物质是 DNA ，而且证明了通过 DNA 可以把一个细菌的性状转移给另一个细菌。二是 20 世纪 50 年代 Watson和 Crick 发现了 DNA 分子的双螺旋结构及 DNA 的半保留复制机理。 三是 20 世纪 60 年代关于遗传信息中心法则的确立， 即生物体中遗传信息是按 DNA→RNA→蛋白质的方向 进行传递的。 1.2 基因工程技术的三大技术基础 三大基本技术问题：一是如何从生物体庞大的双链 DNA 分子中将所 需的基因片段切割下来；二是如何将切割下来的 DNA 片段进行繁殖扩增； 三是如何将所获得的基因片段重新连接。 20 世纪 70 年代，由 Smith 等人 发现的核酸限制性内切酶、 DNA 连接酶和可以