赖氨酸脱羧酶试验标准操作规程.docxVIP

赖氨酸脱羧酶试验标准操作规程 1．目的 规范赖氨酸脱羧酶试验标准操作规程。 2．原理 某些细菌能产生氨基酸脱羧酶，使该种氨基酸脱去羧 基，生成胺（如赖氨酸→尸胺，鸟氨酸→腐胺，精氨酸→精 胺），从而使培养基变碱性，指示剂变色。 3．试剂 3.1 基础液成分 蛋白胨  5g  牛肉浸膏  5g 溴甲酚紫  0.1g  甲 酚 红 0.005g 吡躲醛（ VB6  ）  0.005g  葡萄糖  0.5g 蒸馏水  1000ml 3.2 制备 基础液加热慢慢溶解，按 酸，调 PH 至 6.0，呈深亮紫色。分装每支  1％浓度加入赖氨4ml，同时配对对 照管（不加氨基酸） ，置 120℃灭菌 15 分钟，冷却后冷藏备 用。 4．质控 大肠埃希菌 ACTT 25922 为紫色，福氏志贺菌 CMCC51573 为黄色。 5.操作步骤 挑取纯菌种接种于含赖氨酸的培养基及不含氨基酸的 对照培养基中，加无菌石蜡油覆盖， 35℃孵育 4 日，每日观 察结果。 6.结果判断 若仅发酵葡萄糖显黄色，为阴性；由黄色变为紫色，为 阳性。对照管为黄色。 7.注意事项 7.1 由于脱羧酶培养基含有蛋白胨，培养基表面的蛋白 胨氧化和脱氨基作用可产生碱性反应，所以培养基应密封。 隔绝空气，以消除假阳性反应。 7.2 不含氨基酸的空白对照管， 孵育 18～ 24 小时后， 仍 保持黄色（发酵葡萄糖） 。 8.临床意义 沙门菌属中除甲型沙门菌赖氨酸反应阳性，志贺菌属和枸橼 酸杆菌属均为阴性。