血清葡萄糖GLU己糖激酶HK法测定法.docxVIP

血清葡萄糖 GLU己糖激酶 HK法测定法 实验原理 己糖激酶紫外比色测定法。 HK 葡萄 糖 + ATP ------------- ﹥ G-6-P+ ADP Mg2+ G6PDH G-6-P + NAD + ------------- ﹥ 6- 磷 酸葡 萄糖 +NADH + H + 标本 ： 2.1 病人准备：12 小时禁食。 2.2 类型：血清或血浆（ EDTA，肝素或氟化钠），标本最 好不要溶血。迅速分离血清或血浆，减少红细胞糖酵解 时葡萄糖的损失。随机收集尿样。 标本存放：血清、血浆应在血液采集 1 小时内，尽早 分离 。加 入 糖分 解抑制 剂（ NaF， KF）后 的 稳定 性： 15 ～ 25℃保存可稳定 1 天,4 ～8℃保存可稳定 7 天。血清中的 葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在 25℃下可稳定 8 个小时，在 4℃下可稳定 72 小时。尿样 应保存在 2～8℃下并尽快进行分析。脑脊髓液如果避免 蒸发可在 2～8℃下稳定至少 5 天，5 天内不检验的标本 应在收集后立即储存在-20 ℃的条件下。 标本运输：常温条件下保存运输。 标本拒收标准：细菌污染、超时送检的的标本。 实验材料 6.1 试剂 威特曼血糖测定试剂盒 试剂 1 ＋试剂 2 6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于 2～8℃，若无污 染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊 度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不 能继续使用。 6.1.4 注意事项：此试剂为体外诊断用。不要入口，吞 下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下 水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的 叠氮钠，如排向下水道请用大量的水冲洗。 6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分 析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文 件。 仪器：奥林巴斯 AU2700 生化分析仪 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯 AU2700 生化 分析仪项目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯 AU2700 生化 分析仪操作规程.SOP 文件 检验结果的判断与分析 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以 2S为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参 见生化室室内质控操作规程.SOP 文件。 11. 计 算 方法 ：以 TruCal U 复合校 准品 血糖 校准 值校 准 仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠 的检测 结果 ，以 mmol/L 报 告。 手工 测定 计算 方法 为： Au 葡萄糖 浓度 （ mmol/L ） ＝ ×校 准液 浓度 As 参 考 值范 围：（ mmol/L ） 新生儿 脐 带血 3.5 ～ 8.8 1 小时 2.0 ～ 5.5 2 小时 2.2 ～ 4.9 5～14 小时 1.9 ～ 4.3 10 ～ 28 小 时 2.6 ～ 4.5 44 ～ 52 小 时 2.7 ～ 4.4 儿童（ 空腹 ） 1 ～ 6 岁 4.1 ～ 7.0 7 ～19 岁 3.9 ～ 5.9 成人（空腹） 3.9 ～ 6.4 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差 别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参 考值。 临床意义：检测血清或血浆中葡萄糖主要用于糖尿病的诊断和治疗监视，还可用于检出新生儿低血糖症、排除胰岛细胞癌以及评估各种疾病碳水化合物代谢状况。血清葡萄糖水平可能会异常高（高血糖）或异常低（低血糖）。葡萄糖测量用于诊断和治疗碳水化合物代谢紊乱，包括糖尿病，新生儿低血糖，自发性低血糖，郎格 罕氏岛细胞癌等。 葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，怀孕的妇女中 很常见。妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之间或一 天之中有一个显著的变化。 脑脊髓液（ CSF）葡萄糖的测定帮助区别病毒性脑膜 炎与细菌性脑膜炎；细菌性脑膜炎和结核性脑膜炎中的 葡萄糖值通常很低（不到的 40%至 50%血清葡萄糖），病 毒性脑膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性脑膜炎（肿 瘤细胞在脑膜中广泛渗透）也使 CSF 葡萄糖值在正常值 以下。 操作性能 14.1 线性 范围： 0.1 ～ 28mmol/L 14.2 精密度：精密度的评估是根据 NCCLS推荐的标准方 法，AU2700 批内精密度小于 3%，总精密度小于 3%。用 于 分析的质控血清和数据处理符合以上的 NCCLS的规则。 批内精密 x s CV 批间精密 x s CV 度 (mmol/L (mmol