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2017 江苏学业水平测试生物实验专题 考点 1 检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质 【实验原理】 (B) 生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。 ⑴还原糖 :单糖、麦芽糖和乳糖 ( 二糖除了蔗糖 ) 50~65 ℃水浴加热 还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 约 2min ⑵蛋白质 蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色 ⑶脂肪 脂肪 + 苏丹 III 染液→橘黄色 脂肪 + 苏丹 IV 染液→红色 【实验材料用具、实验方法步骤】 (A) 结果分析（ C） ⑴还原糖的检测和观察 材料用具：（ 1）实验材料：苹果或梨匀浆，马铃薯匀浆 （2 ）配制：甲液： mL的 NaOH溶液 + 乙液： mL CuSO4 溶液 使用：混合（甲液 2mL，乙液 4-5 滴）后使用，且现配现用。 条件： 50-60 ℃水浴加热 实验步骤： 选材→制备组织样液→加入斐林试剂→水浴加热→显色（砖红色沉淀） 实验结果分析： 还原性糖：如果出现砖红色沉淀，则待测样品中含有还原糖，反之；则没有。 注意事项： ① 防止颜色的干扰：取材白色或近于白色，如： 苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜等。 不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料。 ② 淀粉和蔗糖不是还原性糖。 ③ 还原糖鉴定，必需水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀 出现。 ④ 留出一些样液，以便与鉴定样液的颜色变化作对比。 ⑵蛋白质的鉴定 4 材料：双缩脲试剂： （A 液） mL NaOH溶液、 （B 液） mL CuSO溶液（分开使用） 实验步骤： 选材与制备： 黄豆浆滤液或蛋白稀释液 （使用蛋清做实验材料要稀释） 呈色反应：取 2mL组织样液，向试管中加入 1mLA 液，摇匀；再加入 B 液 4 滴，并摇匀。 组织样液变成紫色。 注意事项 ① 双缩脲试剂 AB液分开使用，先加 1mL mL NaOH溶液，再加 4 滴 mL CuSO4 溶液或者先 加 A 液，后加 B 液。 ② 用鸡蛋清作实验材料，鸡蛋清必须稀释，以免试验后黏住试管，不易洗刷。 ③ 留出一些样液，以便与鉴定样液的颜色变化作对比。 ⑶脂肪的检测和观察 实验步骤：方法一：花生种子匀浆 +3 滴苏丹 III 染液→橘黄色 方法二： （此法需要使用显微镜，因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴） 取材：做脂肪的鉴定实验，应选择 富含脂肪的种子 ，以花生种子为最佳，实验 前需浸泡 3-4h 。将子叶削成薄片 ①选取最薄的切片 制片 ②在切片上滴 2-3 滴苏丹Ⅲ染液（染色 3min ），染色时间不宜过长 ③去浮色（ 1-2 滴体积分数 50%的酒精溶液，因为苏丹Ⅲ溶于酒精） ④制成临时装片（吸去酒精，加 1 滴蒸馏水，盖上盖玻片） 观察：使用显微镜。先用低倍镜观察，再用高倍镜观察 结论：视野中有被染成橘黄色的脂肪颗粒，说明有脂肪存在。 注意事项： 花生种子切片要薄，只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。 【小结】① 斐林试剂与双缩脲试剂的比较