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杜仲药理作用探讨 1、杜仲的繁殖与保护 1.1 无性繁殖 和其他所有栽培林木一样,良种选育是杜仲资源开发中极其重要的基础 性工作，但杜仲树体高大,生长周期长,生长环境较难控制, 采用常规方法进行育种很难实施。赵树泉通过实践研究提出了插根育苗、树蔸育苗、休眠枝扦插育苗等无性繁殖的方法[4] 。马小峰等通过对不同生长素种类、不同浓度二因素随机区组设计，得出杜仲扦插育苗以 ABT1 号生 根 粉 ，浓 度 为 1.0mg/L ， 采 穗 母树 为 1 年 ，扦 插 时间 以 6 月中 旬 为 最好 [5] 。 孟 宪 民等也提出利用杜仲的萌枝力极强这一特性进行无性繁殖，以获得新的植株。其方法为在冬季结合施肥，松动根际周围的土壤，损伤其部分侧根，促使其产生根蘖条，第 2 年将萌蘖产生的小苗移走定植。也 可将老龄杜仲伐后，加强水肥管理，促使其萌生蘖条，在蘖条基部进行刻伤并培土，待第 2 年蘖条产生新根后分离定植[2] 。 1.2 组织培养研究 杜仲繁殖主要采用播种育苗方法，但其是雌雄异株，定植 10年以上 才能开花结果，种子结实有限，靠种子繁殖难以满足发展需要。据 报道，采用组培的方法繁殖杜仲,生产周期短,繁殖系数高,成本低,经济效益高。另外，组培快速繁殖可以保证种苗形状一致,克服种子繁殖苗木观赏形状不一致的缺点,提高苗木的商品规格,有利于进行工厂化生产。李 俊红等通过实验得出,杜仲组织培养的不同培养阶段优化的最适培养基分别为:诱导 愈伤 组 织的 最 适 培养 基 为 MS + 1.5mg/L NAA + 2.0mg/L BA, 诱 导率 为 95%; 愈 伤组 织 继 代增 殖最 适 培养 基 为 MS +1.0mg/L NAA + 2.0mg/L BA, 成活 率 为 98.5%; 不 定芽 分 化 的 最适 培 养 基为 MS +0.5mg/L NAA +2.0 mg/L BA, 分 化率 为 40%; 最适 生 根 培养 基 为 1/2MS +1.5mg/L IBA, 生 根 率 为 92.5%[6] 。 1.3 杜仲内生真菌的研究 近年来随着人们对内生真菌研究的深入，发现通过人工发酵方法生产与其宿主植物相同的特有药用活性成分是可能的。谢辉等[7] 从杜仲的叶片中分离出的内生真菌代谢产物具有抗氧化活性作用。王梅霞等[8]从采自江苏和陕西的杜仲组织中共分离获得 254 株内生真菌，根据形态学特征鉴定分属于 9 个属。研究结果表明从不同地点杜仲组织中以及从杜仲不同部位组织中分离获得的内生真菌的类群与分布存在明显差异。沈书庆等[9]由杜仲植株的根、茎、叶分离到内生真菌，分别对各菌株进行液体培养，筛选出能产生与杜仲药材相同或相似黄酮类化合物的内生真菌。苏印泉等[10] 以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌为测试菌种对杜仲根、茎、叶中分离出的 20 株内生真菌及其次生代谢物进行抗菌活性筛选，结果表明：有 15 个菌株至少对 1 种实验细菌具有抑菌活性，19株的代谢产物至少对 1 种实验细菌具有抑菌活性，其中有 3 株内生真菌及其次生代谢产物对测试病原细菌均有较强抑制作用。李爱华等[11] 从树龄达 7 年以上杜仲皮中分离得到 122 株内生菌,其中真菌 75 株，细菌 47 株，经摇瓶培养后分析各菌株产松脂醇二葡萄糖苷(PDG)的能 力 ，结 果 发 现有 8 株 菌 能产 生 PDG ， 最 高产 量 可 达 13.387mg/L 。 因此 ， 探 索通 过 内 生真菌产生与宿主植物相同成分的这一途径，将对杜仲的保护提供新的思路。 1.4 遗传多样性研究 杜仲作为古老的稀有物种和重要经济植物，需要得到很好的保护。 保护一个物种不仅要保存一定的个体数量,更重要的是要有目的的尽可能多地保存其种内的 遗传多样性。王瑷琦等采用随机扩增多态 DNA(RAPD) 方法对杜仲的 16 个群体、260 个个 体进行遗传多样性分析，结果显示用 10个随机引物共扩增出 110 条清晰条带,其中多态性条带为 106 条， 总 的多 态 位 点百 分 率 为 96.36 ，平 均 多态 位 点 百分 率 为 38.92 。 Nei’s基 因 多 样性指 数 H = 0.2461 ， Shannon’s 多 态性 信 息 指数 I = 0.3868 。 基 因 分化 系 数 Gst = 0.4244 。 杜仲种内具有丰富的遗传多样性,而不同群体内部的遗传多样性低。因此，针对杜仲群体间遗传分化大，群体内遗传多样性普遍较低的特点，保护其遗传多样性需要尽可能多地保护更多的种群。同时应加强对原生母树的调查与保护工作，包括对散生于农家庭院周围的半野生资源的保护。针对杜仲种内丰富的形态和遗传变异，需继续开展形态变异与遗传变异的研究，为进一步选育杜仲优良品种提供