茶多酚调节猪肠上皮细胞屏障功能和炎症反应机制研究.pdfVIP

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2021-01-11 发布于江苏
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茶多酚调节猪肠上皮细胞屏障功能和炎症反应机制研究.pdf

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茶多酚调节猪肠上皮细胞屏障功能和炎症反应机制研究目录摘要i Abstract iii 缩略语表（Abbreviation ）v 1. 前言 1 1.1 茶多酚 1 1.1.1 茶多酚的概述 1 1.1.2 茶多酚的研究进展 1 1.2 产毒素性大肠杆菌2 1.3 肠上皮屏障的结构和组成2 1.3.1 肠上皮细胞3 1.3.2 肠上皮细胞紧密连接3 1.4 Toll 样受体4 1.4.1 TLR 的种类与功能4 1.4.2 TLR 信号通路负调控因子及其功能5 2. 研究目的与意义7 3. 实验材料和方法8 3.1 实验材料8 3.1.1 菌株和茶多酚8 3.1.2 主要试剂8 3.1.3 培养基的配制8 3.1.4 主要缓冲液及其配制8 3.1.5 主要仪器与设备 10 3.1.6 引物 10 3.1.7 实验动物和实验细胞 11 3.2 实验方法 11 3.2.1 细胞复苏和培养 11 3.2.2 细菌活化和培养 12 3.2.3 茶多酚抑菌活性实验 12 3.2.4 细菌生长曲线的测定 13 3.2.5 细胞黏附实验 14 3.2.6 茶多酚-肠上皮细胞-大肠杆菌K88 互作条件的确定 14 3.2.7 细胞处理 17 3.2.8 荧光定量PCR 分析 18 3.2.9 Western blotting 分析20 I 华中农业大学2020 届硕士研究生学位论文 3.2.10 茶多酚对感染ETEC K88 小鼠炎症反应的作用研究20 3.2.11 数据处理与统计分析23 4.结果与分析24 4. 1 茶多酚对大肠杆菌K88 抑菌活性测定26 4.2 茶多酚对大肠杆菌K88 生长活性的影响测定26 4.3 茶多酚抑制大肠杆菌K88 对IPEC-J2 细胞粘附实验25 4.4 茶多酚-肠上皮细胞-大肠杆菌K88 互作条件的确定25 4.4. 1 大肠杆菌K88 对IPEC-J2 细胞存活率的影响25 4.4.2 大肠杆菌K88 与IPEC-J2 细胞互作浓度的确定26 4.4.3 大肠杆菌K88 与IPEC-J2 细胞互作时间的确定26 4.4.4 茶多酚对IPEC-J2 细胞存活率的影响27 4.4.5 茶多酚与IPEC-J2 细胞共培养条件的确定27 4.5 茶多酚对感染大肠杆菌K88 的猪肠上皮细胞屏障功能的影响28 4.5.1 茶多酚对感染大肠杆菌K88 的IPEC-J2 细胞紧密连接蛋白mRNA 表达的影响.28 4.5.2 茶多酚对感染大肠杆菌K88 的IPEC-J2 细胞紧密连接蛋白蛋白表达的影响29 4.6 茶多酚对感染大肠杆菌K88 的猪肠上皮细胞先天免疫反应的影响30 4.6.1 茶多酚对感染大肠杆菌K88 的IPEC-J2 细胞炎症反应相关基因mRNA 表达的影响 30 4.6.2 茶多酚对感染大肠杆菌K88 的IPEC-J2 细胞TLR2 mRNA 表达的影响32 4.6.3 茶多酚对感染大肠杆菌K88 的IPEC-J2 细胞TLR 信号通路负调控因子mRNA 表达的影响……………………………………………………………………………………..32 4.7 茶多酚对感染ETEC K88 小鼠炎症反应的作用研究33 4.7. 1